[发明专利]一种用于检测登革热NS1蛋白的分子印迹聚合物微球及其应用

说明书

本发明公开了一种用于检测登革热NS1蛋白的分子印迹聚合物微球，其包括二氧化硅微球以及覆盖在其表面的分子印迹聚合物层，所述分子印迹聚合物层具有由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的多肽片段形成的空穴。本发明的分子印迹聚合物微球能够准确、方便、高效、快速、灵敏、低成本地实现对登革热NS1蛋白的检测。

技术领域

本发明属于化学领域，具体涉及一种用于检测登革热NS1蛋白的分子印迹聚合物微球及其应用。

背景技术

登革热(dengue fever)是主要由伊蚊叮咬感染登革病毒引起，伴有头痛、肌肉骨关节痛、发热、淋巴结肿大、疲乏等临床特征的一种急性传染病，广泛流行于热带和亚热带，可能出现多种临床表现，从轻度发热病到严重和致命疾病不等。随着疾病的发展，在发热阶段，症状与其它虫媒病毒感染以及麻疹、风疹、肠病毒感染、腺病毒感染和流感相似，需要根据临床表现和当地疾病流行情况结合诊断。

登革热由感染登革热病毒引起，根据患者血清中抗体的类型不同，可以将登革热病毒分为DEN-1、DEN-2、DEN-3和DEN-4等四个血清型。四个不同亚型的登革热病毒RNA序列基本一致。RNA翻译的蛋白分子主要分为两类，其中前端的结构基因片段翻译出C、prM、E等结构蛋白，之后的非结构基因片段翻译出NS1与其他六个非结构蛋白。首先翻译出的C蛋白又名衣壳蛋白，是登革热等黄热病科病毒的共通结构，起到保护病毒RNA的作用。prM蛋白是M蛋白的前驱体，经过糖基化的结构蛋白M会和结构蛋白E以一定的方式结合在登革热病毒表面。结构蛋白一般是同属病毒共同含有的蛋白分子，常用于鉴定病毒的种类，有些结构蛋白还起识别细胞的作用。非结构蛋白不和RNA组合成病毒，但在病毒识别、复制的过程中起到一定的作用。作为第一个翻译的非结构蛋白，登革热NS1蛋白是登革热病毒翻译的多种蛋白中三个糖蛋白之一，是登革病毒的翻译的最重要非结构蛋白。1985年GREG W.SMITH，NS1蛋白可以与登革热患者血清中的抗体结合，说明登革热NS1蛋白在登革热病毒复制和感染过程中起着关键作用，是诊断登革热的重要指标。登革热NS1蛋白主要以二聚体形式存在，其分子量约42～50KDa，分子量主要由NS1蛋白上连接的糖基侧链的大小决定。

深入研究登革热NS1蛋白的抗原性发现，尽管登革病毒存在四种血清亚型，但是DEN-NS1序列翻译出的NS1蛋白的特异性抗体能与其他型NS1蛋白发生交叉反应。这说明四型登革热的NS1蛋白存在共同性，登革热NS1蛋白与其对应抗体可以用来诊断登革热。Jyh-Hsiung Huang等发现登革热NS1蛋白的部分氨基酸序列肽段可以引起登革热抗体血清发生免疫结合反应，对应的lgM和lgG抗体在患者发热后2天和9天可被检测出，患者康复后仍然能检测出较高的登革热NS1蛋白抗体滴度。相关研究表明，NS1蛋白与登革热患者病情发展有着重大关系，原发性登革热感染者在出现发热症状后不久即可检测出NS1蛋白与NS1蛋白抗体，但继发性登革热感染者(包括重症登革热患者)的血清抗原抗体检测含量较低。