[发明专利]被覆磷脂双分子层、单磷脂A及环二核苷酸的铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统及其制备方法

权利要求书

1.一种被覆磷脂的单磷脂A及环二核苷酸共修饰的铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统的亚单位疫苗，其特征在于，

取含有平均粒径80纳米且w/v浓度为0.5％的氢氧化铝纳米粒AN的纯水溶液，在25℃、搅拌条件下，按照AN/MPLA/cGAMP＝50:3:1质量比，滴加含有MPLA胶束及2’3’-cGAMP的纯水溶液，继续搅拌20min，形成表面结合MPLA与cGAMP氢氧化铝纳米粒AN-MC纯水溶液；

另按照SPC/DOTAP质量比10:1取脂质材料，置于梨形玻璃瓶，加氯仿溶解，35℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成SPC/DOTAP薄膜；

以AN-MC纯水溶液水化附着于容器内壁的SPC/DOTAP薄膜，控制AN/SPC-DOTAP质量比例为50:6，形成PLAN-MC；

再按照AN/OVA＝20:1质量比例，在25℃、搅拌条件下，加入模型抗原卵清蛋白，继续搅拌20分钟，得到OVA-PLAN-MC，以HEPES缓冲溶液调为等渗，即制备为OVA-PLAN-MC亚单位疫苗。

2.一种被覆磷脂的单磷脂A及环二核苷酸共修饰的铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统的亚单位疫苗，其特征在于，

取含有平均粒径35纳米且w/v浓度为0.5％的氧化铝纳米粒AN的纯水溶液，在25℃、搅拌条件下，按照AN/MPLA/cGAMP＝50:2:1最终质量比，滴加含有MPLA胶束及2’,3’-cGAMP的纯水溶液，继续搅拌20min，形成AN-MC；

再按照AN/OVA质量比为25:1，在25℃、搅拌条件下，加入OVA，继续搅拌20分钟，得到OVA-AN-MC；

在25℃、搅拌条件下，将w/v浓度为2％的SPC脂质体水溶液滴入含有OVA-AN-MC的水溶液，至AN/SPC质量比例为5:1，继续搅拌20分钟，形成OVA-PLAN-MC，以HEPES缓冲溶液调为等渗，即制备为OVA-PLAN-MC亚单位疫苗。

3.一种被覆磷脂的单磷脂A及环二核苷酸共修饰的铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统的亚单位疫苗，其特征在于，

取平均粒径90纳米且w/v浓度为0.5％含有磷酸铝纳米粒的纯水溶液，在25℃、搅拌条件下，按照AN/MPLA/c-di-GMP＝50:5:1质量比，滴加含有MPLA胶束及c-di-GMP纯水溶液，继续搅拌20min，形成AN-MC纯水溶液；

另按照SPC:DOTAP质量比8:1取脂质材料，置于梨形玻璃瓶，加氯仿溶解，35℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成SPC/DOTAP薄膜；

以AN-MC纯水溶液水化附着于容器内壁的SPC/DOTAP薄膜，控制AN/SPC/DOTAP质量比例为50:3.7:0.3，形成PLAN-MC；再按照AN/OVA＝25:1质量比例，在25℃、搅拌条件下，加入模型抗原卵清蛋白OVA，继续搅拌20分钟，得到OVA-PLAN-MC；以HEPES缓冲溶液调为等渗，即制备为以OVA-PLAN-MC为VADS的亚单位疫苗。

4.一种被覆磷脂的单磷脂A及环二核苷酸共修饰的铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统的亚单位疫苗，其特征在于，

取含有平均粒径35纳米w/v浓度为0.5％的氧化铝纳米粒的纯水溶液，在25℃、搅拌条件下，按照AN/MPLA/c-di-AMP＝50:2:1最终质量比，滴加含有MPLA胶束及c-di-AMP纯水溶液，继续搅拌20min；

再按照AN/OVA质量比50:1，在25℃、搅拌条件下，加入模型抗原卵清蛋白OVA，继续搅拌20分钟，得到AN-MC-OVA水溶液；在25℃、搅拌条件下，将w/v浓度为2％的DOPE脂质体HEPES水溶液滴入AN-MC-OVA水溶液，至AN/DOPE质量比例为50:6，继续搅拌20分钟，形成OVA-PLAN-MC；以HEPES缓冲溶液调为等渗，即制备为OVA-PLAN-MC亚单位疫苗。