[发明专利]一种单纯疱疹病毒1型和2型分型核酸检测试剂盒

权利要求书

1.一种单纯疱疹病毒1型和2型分型核酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括PCR反应液1、PCR反应液2、阳性对照和阴性对照；

所述PCR反应液1包括：

如SEQ ID NO：1所示的HSV-1型上游引物，如SEQ ID NO：2所示的HSV-1型下游引物，如SEQ ID NO：3所示的HSV-1型荧光探针；

如SEQ ID NO：4所示的HSV-2型上游引物，如SEQ ID NO：5所示的HSV-2型下游引物，如SEQ ID NO：6所示的HSV-2型荧光探针；

DNA聚合酶，尿嘧啶DNA糖基化酶，dNTP，PCR缓冲物，PCR扩增增强剂，防腐剂，水；

所述PCR反应液2包括：醋酸锰、防腐剂和水。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液1还包括内标引物和探针，所述内标引物和探针包括：如SEQ ID NO：7所示的人β-珠蛋白基因上游引物，如SEQ IDNO：8所示的人β-珠蛋白基因下游引物，如SEQ ID NO：9所示的人β-珠蛋白基因荧光探针。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶为rTthDNA聚合酶，所述尿嘧啶DNA糖基化酶为UDG酶，所述dNTP为dATP、dGTP、dCTP、dUTP的组合，所述PCR缓冲物包括三(羟甲基)甲基甘氨酸和乙酸钾，所述PCR扩增增强剂由DMSO、Tween20和甘油组成，所述防腐剂为叠氮化钠。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液1中各组分浓度为：

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述三(羟甲基)甲基甘氨酸的pH值为7.0～9.0。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述HSV-1型荧光探针5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭基团标记BHQ1；

所述HSV-2型荧光探针5’端标记报告荧光基团ROX，3’端标记淬灭基团标记BHQ2；

所述人β-珠蛋白基因荧光探针5’端标记报告荧光基团Cy5，3’端标记淬灭基团标记BHQ2。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液2中各组分浓度为：

醋酸锰 1～5mM；

防腐剂 0.05～0.2％。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液1与所述PCR反应液2的体积比为(10～30)∶(5～15)。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为单纯疱疹病毒1型和2型靶标序列质粒，阴性对照为生理盐水。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述单纯疱疹病毒1型和2型靶标序列质粒的浓度为1×10⁵～5×10⁵copies/mL。