[发明专利]一种高效快速检测及定量血清或血浆核酸的试剂盒及方法有效
| 申请号: | 202010044493.4 | 申请日: | 2020-01-15 |
| 公开(公告)号: | CN111139313B | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
| 发明(设计)人: | 温维佳;高一博;杨成勇 | 申请(专利权)人: | 深圳市尚维高科有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京华创智道知识产权代理事务所(普通合伙) 11888 | 代理人: | 彭随丽 |
| 地址: | 518000 广东省深圳市龙岗区吉华街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 高效 快速 检测 定量 血清 血浆 核酸 试剂盒 方法 | ||
1.一种高效快速检测及定量血清或血浆核酸的试剂盒,包括核酸释放剂、反应液、对照品、标准品、内标,其特征在于:
当模板为DNA时,所述的核酸释放剂由300mM~600mM的KOH、质量浓度为0.06%~0.1%的十二烷基硫酸锂或十二烷基硫酸钠、体积百分浓度为0.05%~2%的吐温20组成,溶剂为无核酶的去离子水;
当模板为RNA时,所述的核酸释放剂由200mM~400mM的KOH、质量浓度为0.06%~0.1%的十二烷基硫酸锂或十二烷基硫酸钠、体积百分浓度为0.05%~2%的吐温20组成,溶剂为无核酸酶的去离子水;
所述反应液由5mM~30mM的KCl、1mM~7mM的MgCl2 、0.1mM~3mM的EDTA-2Na、5mM~100mM的Tris-乙酸或Tris-HCl、5mM~20mM的(NH4)2SO4、质量浓度为0.01%~0.04%的BSA、体积百分浓度为2%~8%的甘油、0.1M~1.4M的甜菜碱、质量浓度为5%~15%的海藻糖、50nM~500nM的上下游引物、50nM~400nM的探针、0~400nM的内标探针、0.1mM~2.5mM的 dNTPs、混合酶、质量浓度为0.02%~0.05%的Proclin 300组成,pH7.0~8.5,溶剂为无核酸酶的去离子水。
2.根据权利要求1所述的高效快速检测及定量血清或血浆核酸的试剂盒,其特征在于,所述dNTPs组成的浓度比例为:dATP:dGTP:dCTP:dTTP:dUTP=1:1:1:1:2。
3.根据权利要求1所述的高效快速检测及定量血清或血浆核酸的试剂盒,其特征在于,所述的上下游引物、探针,其核酸序列是根据与试剂盒检测项目一致的病原微生物的核酸序列而设计的特异性序列,所述的内标探针是根据内标序列设计的特异性探针,其中,探针、内标探针分别标记CY5、ROX、JOE、FAM、HEX、TET、TAMRA中的一种荧光。
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