[发明专利]Echo30单克隆抗体的制备及其用途

说明书

本发明涉及Echo30单克隆抗体的制备及其用途。本发明的抗体的CDR序列如SEQ ID NO：1‑3和SEQ ID NO：5‑7所示，抗体重链可变区的序列如SEQ ID NO：4所示，抗体轻链可变区的序列如SEQ ID NO：8所示。本发明的抗体可使用本领域常规方法制备，利用体外实验证明纯化的抗体具有Echo30结合特异性和中和Echo30的中和活性，故本发明的抗体可用于临床诊断或治疗。

技术领域

本申请属于生物医学领域，具体涉及Echo30单克隆抗体的制备及其用途。

背景技术

埃可病毒(Echovirus)属于肠道病毒(Enteroviruses，EVs)。肠道病毒由微小核糖核酸病毒科中的67种独特的血清型的病毒组成。小核糖核酸病毒是正链RNA 病毒，包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒A组和B组、埃可病毒、肠病毒68-71 型。埃可病毒颗粒体积极小，呈球形，病毒颗粒由简单的衣壳和单正股RNA组成，裸露无膜，直径小于30nm。病毒的衣壳含4种蛋白质，分别为VP1、VP2、 VP3、VP4。病毒的RNA为单一分子，长约7.44kb，是病毒翻译和复制的模板。有64种不同的血清型的肠道病毒可引起人类感染，其中已知埃可病毒有34个血清型。在临床上病毒的分型主要基于它们的基因特征，埃可病毒属于人肠道病毒 HEV B种。与其它肠道病毒一样，埃可病毒的最适生长温度为35-37℃，能在猴肾、人羊膜细胞、人喉癌细胞、横纹肌肉瘤、人胚肺等细胞进行培养。

人类埃可病毒30(Echo30)是埃可病毒最常见的类型之一，是引起儿童和成人无菌性脑膜炎的主要病原体。在儿童病毒性脑炎病例中，由Echo30引起的病例占80％～93％。该病毒是一种无胞膜病毒，在高盐、高pH值等恶劣环境下均可稳定存活。肠道病毒排毒时间长，患者感染后的数周内仍能从呼吸道或肠道中排出病毒，从而引起病毒传播、感染甚至暴发或流行。近年来在我国台湾、浙江、福建和河南等地多次报道由Echo30引起病毒性脑炎的暴发或流行。

目前对Echo30相关研究比较少，更无特异性抗体的报道。本申请目的是制备针对Echo30的特异性抗体以便检测Echo30及其导致的相关疾病。

发明内容

本发明提供与Echo30特异性结合的抗Echo30的抗体或其抗原结合片段。例示性CDR的氨基酸序列以及例示性抗Echo30抗体的重链及轻链的VH区及VL 区的氨基酸序列提供于下文具体实施方式中。

抗Echo30的抗体可包括更改抗体的特性的修饰和/或突变，这些特性诸如，延长半衰期、增加或减少ADCC等如本领域已知。

本文提供包含编码本发明的抗Echo30的抗体的核苷酸序列的核酸，以及包含核酸的载体。另外，本文提供用包含编码所披露的抗Echo30的抗体的核苷酸序列的载体转化的原核及真核宿主细胞，以及经工程化以表达核苷酸序列的真核 (诸如，哺乳动物)宿主细胞。还提供通过培养宿主细胞及回收抗体来制造抗体的方法，且进一步在下文具体实施方式中论述。

本发明提供检测Echo30的产品，所述产品包括本发明的Echo30抗体或其抗原结合片段。本发明提供诊断Echo30感染或其导致的疾病的产品，所述产品包括本发明的Echo30抗体或其抗原结合片段。

在另一方面中，本发明提供包括本文所描述的抗Echo30的抗体的组合物。组合物通常包含一种或多种如本文所描述的抗Echo30的抗体和/或其盐、及一种或多种赋形剂、运载体或稀释剂。

本发明提供用抗Echo30的抗体治疗经诊断患有埃可病毒感染导致的疾病的方法。该方法通常涉及向受试者施用一定量的本文所描述的可有效地提供治疗益处的抗Echo30的抗体。

可施用抗Echo30的抗体作为单一治疗剂(单药疗法)或辅助通常(但非必需) 用于治疗埃可病毒感染导致的疾病的那些的其他治疗剂，或与这些其他治疗剂一起施用。治疗剂通常应以其经批准的剂量、施用途径及施用频率来使用，但可以更低的剂量来使用。