[发明专利]一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡及其制备方法在审
| 申请号: | 202010026721.5 | 申请日: | 2020-01-10 |
| 公开(公告)号: | CN111197071A | 公开(公告)日: | 2020-05-26 |
| 发明(设计)人: | 陈军刚 | 申请(专利权)人: | 杭州联晟生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/52 | 分类号: | C12Q1/52 |
| 代理公司: | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人: | 金方玮 |
| 地址: | 310000 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 光化学 检测 转氨酶 测试 及其 制备 方法 | ||
1.一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,包括:测试卡上壳,测试卡下壳,设置于所述测试卡下壳上的主测试孔和对照测试孔,设置于所述测试卡上壳上的加样孔,设置于所述测试卡上壳下的扩散膜,设置于所述扩散膜下的第一滤血膜,设置于所述第一滤血膜下并分别对应于主测试孔和对照测试孔的两个第二滤血膜,设置于两个第二滤血膜下的第一反应膜和第二反应膜,设置于所述第一反应膜、第二反应膜下的单面胶;
所述第一反应膜上的第一反应液的配方包括:L-丙氨酸50-500mM,丙酮酸氧化酶50-200KU/L,α-酮戊二酸5-100mM,过氧化物酶50-200KU/L,焦磷酸硫胺素0.1-1mM,氯化镁0.1-5g/L,4-氨基安替比林1-50mM,显色剂1-50mM,成膜剂0.1-10g/L,稳定剂1-50g/L,0.1-2M的缓冲液;
所述第二反应膜上的第二反应液的配方包括:丙酮酸氧化酶50-200KU/L,过氧化物酶50-200KU/L,焦磷酸硫胺素0.1-1mM,氯化镁0.1-5g/L,4-氨基安替比林1-50mM,显色剂1-50mM,成膜剂0.1-10g/L,稳定剂1-50g/L,0.1-2M的缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述显示剂包括:TOOS,DAOS,MAOS,TODB。
3.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述成膜剂包括:羟甲基纤维素,羟乙基纤维素,羧甲基纤维素,海藻酸钠,环湖精。
4.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡及其制备方法,其特征在于,所述稳定剂包括:聚乙二醇一万,聚乙二醇6000,聚乙烯吡咯烷酮,海藻糖,蔗糖,甘露醇。
5.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述缓冲液包括:磷酸缓冲液,TRIS缓冲液,MES缓冲液。
6.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述第一反应膜和第二反应膜包括:聚砜膜,尼龙膜。
7.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述扩散膜包括:亲水性聚酯网纱,疏水性聚酯网纱,尼龙网纱。
8.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述第一反应液的配方包括:L-丙氨酸50mM,丙酮酸氧化酶100KU/L,α-酮戊二酸50mM,过氧化物酶100KU/L,焦磷酸硫胺素0.2mM,氯化镁0.2g/L,4-氨基安替比林10mM,MAOS 10mM,海藻酸钠0.1-10g/L,海藻糖1-50g/L,0.05M的PH=6的磷酸缓冲液。
9.根据权利要求1所述的一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡,其特征在于,所述第二反应液的配方包括:丙酮酸氧化酶100KU/L,过氧化物酶100KU/L,焦磷酸硫胺素0.2mM,氯化镁0.2g/L,4-氨基安替比林10mM,MAOS 10mM,海藻酸钠0.1-10g/L,海藻糖1-50g/L,0.05M的PH=6的磷酸缓冲液。
10.一种光化学法检测谷丙转氨酶的测试卡的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一:按照如下配方配制第一反应液,
配方包括:L-丙氨酸50-500mM,丙酮酸氧化酶50-200KU/L,α-酮戊二酸5-100mM,过氧化物酶50-200KU/L,焦磷酸硫胺素0.1-1mM,氯化镁0.1-5g/L,4-氨基安替比林1-50mM,显色剂1-50mM,成膜剂0.1-10g/L,稳定剂1-50g/L,0.1-2M的缓冲液;搅拌一小时后待用;
步骤二:按照如下配方配制第二反应液,
配方包括:丙酮酸氧化酶50-200KU/L,过氧化物酶50-200KU/L,焦磷酸硫胺素0.1-1mM,氯化镁0.1-5g/L,4-氨基安替比林1-50mM,显色剂1-50mM,成膜剂0.1-10g/L,稳定剂1-50g/L,0.1-2M的缓冲液;
步骤三:制备第一反应膜,
将反应膜浸泡在第一反应液中1-10min后取中,25-50度环境下干燥10-60min后待用;
步骤四:制备第二反应膜,
将反应膜浸泡在第二反应液中1-10min后取中,25-50度环境下干燥10-60min后待用;
步骤五:在单面胶上依次贴好第一反应膜和第二反应膜,然后再依次贴好第二滤血膜、第一滤血膜、扩散膜,贴完后装入测试卡下壳,然后将测试卡上壳盖上,即做了成品测试卡。
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