[发明专利]聚底物及其使用方法

权利要求书

1.一种包含聚底物的组合物，其中所述聚底物包含：

(i)聚合物分子，

(ii)附着于所述聚合物分子的多个底物分子，和

(iii)附着于所述聚合物分子的结合部分，

其中所述底物分子是发光酶底物；并且

其中所述结合部分特异性结合至：

(a)引物延伸产物的3'末端核苷酸，或

(b)第二结合部分，并且所述第二结合部分与引物延伸产物的3'末端核苷酸特异性结合。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述聚合物分子是多糖聚合物。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述多糖聚合物包括葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖或其组合。

4.根据权利要求2或3所述的组合物，其中所述多糖聚合物是直链或支链的。

5.根据权利要求2至4中任一项所述的组合物，其中所述多糖聚合物包含5-10000个单体。

6.根据权利要求2至5中任一项所述的组合物，其中所述多糖聚合物是均聚物。

7.根据权利要求2至6中任一项所述的组合物，其中所述多糖聚合物是β-葡聚糖或α-葡聚糖。

8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述多糖聚合物选自由右旋糖苷、淀粉、糖原、支链淀粉、纤维素、热凝多糖、海带多糖、地衣聚糖和酵母聚糖组成的群组。

9.根据权利要求2所述的组合物，其中所述多糖聚合物是右旋糖苷。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述底物分子与所述聚合物分子共价结合。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的组合物，其中所述多个底物分子选自吖啶酯、萤光素、鲁米诺、腔肠素、异鲁米诺、2,2'-叠氮基双[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]-二铵盐(ABTS)、邻苯二胺二盐酸盐(OPD)、3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)、邻硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)、其衍生物或其组合。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的组合物，其中，所述聚底物包含单一种类的所述底物分子。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合物，其中所述底物分子是荧光素、鲁米诺、异鲁米诺或腔肠素。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物，其中，所述聚底物包含五(5)个或更多个底物分子，并且所述五个或更多个底物分子可以是单一种类或不止一个种类。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的组合物，其中所述结合部分是识别所述引物延伸产物的3'末端核苷酸中的所述碱基、所述糖、可裂解的保护基团或这些组分的组合的亲和试剂。

16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述亲和试剂是抗体、确定剂、适体或结蛋白。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的组合物，其中所述结合部分结合dNTP类似物的亲和标记配体。

18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述dNTP类似物包含将所述亲和标记配体连接至核碱基的可裂解的接头。

19.根据权利要求17的组合物，其中所述亲和标记配体是生物素、亲和素、链霉亲和素或抗原。

20.根据权利要求17的组合物，其中所述结合部分是生物素、抗生物素蛋白、链霉亲和素或抗原或抗体。