[发明专利]丁酸钠的用途及含有丁酸钠的培养体系

说明书

提供了一种包含丁酸钠的组合物及其促使人造血祖细胞向人造血干细胞转变的用途。在脐带血造血干细胞扩增培养过程中，加入细胞因子的同时加入丁酸钠，能够既增加造血干细胞数量，又提高造血干细胞CFU集落形成能力，使造血干细胞处于增殖不分化的状态，达到临床移植需求。

技术领域

本发明涉及造血干细胞技术领域，特别涉及丁酸钠的用途及含有丁酸钠的培养体系。

背景技术

造血干细胞是成体内极其重要的一类干细胞，尽管其仅占人体血细胞比例不到万分之一，但具备极强的自我更新能力和分化能力，能长期重建机体整个血液系统和免疫系统，具备各世系血细胞和免疫细胞的分化潜能。因此，造血干细胞被广泛应用于白血病、淋巴瘤等恶性血液疾病的临床治疗。不仅如此，造血干细胞移植还能帮助治疗代谢性疾病、先天性免疫缺陷、糖尿病等病症。据统计，每年全世界有超过40，000例造血干细胞移植手术。目前，造血干细胞的供体主要来源于患者自体或者与患者HLA匹配的捐献者的骨髓和动员的外周血造血干细胞。尽管该移植技术疗效很好，但由于其存在HLA配型的严格配对要求，仍有大约70％的患者不能获得合适的供体而无法接受治疗；即使接受了治疗，多数患者也会经受程度各异的移植物抗宿主病(GVHD)的折磨。脐带血造血干细胞对于HLA配型的要求相对较低，且免疫原性低，再加上其获取方便、来源丰富，逐渐成为造血干细胞移植供体的一大来源。然而由于单份脐带血所含造血干细胞数量少，仅能满足体重35公斤以下的儿童移植一次，不足以短时间内重建成人患者的造血系统和免疫系统，从而增高机会性感染致死率，因此临床急需一种增加脐带血造血干细胞数量的方法。

造血祖细胞是一类自我更新能力和分化潜能低于造血干细胞的细胞类型，虽然表达CD34表面抗原，但不表达造血干细胞特异的CD90表面分子，而为CD45RA阳性。因此，可以利用CD90和CD45RA区分造血干细胞和造血祖细胞。造血祖细胞具备短期(不到一个月)的体内移植能力，能分化为红细胞、淋巴细胞、髓系细胞等多种血液细胞。由于其不具备长期移植重建受体血液系统的能力，常常被排除在血液细胞移植治疗恶性血液病的手术之外。但造血祖细胞体内含量远远高于造血干细胞(0.03％vs 0.0001％)，若能够将造血祖细胞转变为造血干细胞，则将大大拓宽造血干细胞的供体来源。

表观修饰在调控细胞命运方面具有重要作用。基因座的甲基化、乙酰化，组蛋白的各类基团修饰直接影响邻近区域基因的开放程度和转录因子结合难度，进而调控基因的表达，完成对细胞状态及命运的调节。因此，表观修饰在更高的层面上影响细胞功能。人们研发了许多表观修饰物来改变细胞命运。近年研究发现表观修饰物对人造血干细胞的体外扩增也有明显促进作用。丁酸钠在细胞重编程领域也引起高度重视，因其能够促进细胞命运改变，被用作IPS制备的催化剂。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提供了丁酸钠的用途及含有丁酸钠的培养体系。本发明研究表明，丁酸钠能够促进造血祖细胞向造血干细胞转变，且能够显著提高造血干细胞体外扩增所得的细胞总量。

本发明提供了丁酸钠在促进造血祖细胞向造血干细胞转变中的应用。

本发明提供了，丁酸钠在制备造血干细胞中的应用。

本发明提供了，丁酸钠和造血祖细胞在制备造血干细胞中的应用。

本发明还提供了一种组合物，其由丁酸钠、TPO、SCF和FLT3L组成。

一种促进造血祖细胞向造血干细胞转变的组合物，其由丁酸钠、TPO、SCF和FLT3L组成。

一种促进造血干细胞体外扩增的组合物，其由丁酸钠、TPO、SCF和FLT3L组成。

本发明实施例中，本发明提供的组合物作为培养基的添加剂，用于促进造血祖细胞向造血干细胞转变和促进造血干细胞扩增。其中，丁酸钠的溶液以无菌ddH₂O配置，母液浓度为200mol/L。