[发明专利]一种治疗肾病的中药组合物中5种大黄蒽醌类成分的检测方法

权利要求书

1.一种用于同时测定治疗肾病的中药组合物中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚中的一种或多种的含量的检测方法，其中所述检测方法通过高效液相色谱法进行测定，所述高效液相色谱法的条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以体积比浓度为0.1％的磷酸水溶液为流动相B，按0～40分钟内流动相A与流动相B的体积比从35：65变化至80：20的梯度进行洗脱。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：分别取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：取所述中药组合物，加入甲醇，超声处理，滤过，取续滤液，即得各种游离蒽醌的供试品溶液；和/或

取所述中药组合物，加入甲醇，超声处理，滤过，取续滤液，减压蒸干，加体积比为4％的盐酸，水浴加热回流，加乙醚萃取，减压蒸干，残渣加甲醇使溶解，滤过，取续滤液，即得总蒽醌供试品溶液；

(3)测定方法：分别精密吸取步骤(1)制备的对照品溶液与步骤(2)制备的供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照所述高效液相色谱法条件测定供试品溶液和对照品溶液的色谱，所述高效液相色谱法的条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以体积比浓度为0.1％的磷酸水溶液为流动相B，按0～40分钟内流动相A与流动相B的体积比从35：65匀速变化至80：20的梯度进行洗脱。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：分别取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：取所述中药组合物，精密称定，精密加入甲醇，称定重量，超声处理10-60分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得各种游离蒽醌的供试品溶液；优选地，超声处理60分钟；和/或

取所述中药组合物，精密称定，精密加入甲醇，称定重量，超声处理60分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，减压蒸干，加体积比为4％的盐酸，水浴加热回流30-60分钟，立即冷却，加乙醚萃取，减压蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移于量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得总蒽醌供试品溶液；优选地，水浴加热回流60分钟；

(3)测定方法：分别精密吸取步骤(1)制备的对照品溶液与步骤(2)制备的供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照所述高效液相色谱法条件测定供试品溶液和对照品溶液的色谱。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中所述中药组合物包含丹参、大黄、太子参、黄连、牛膝、半夏、红花、茯苓、陈皮、甘草。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其中按重量份数计，所述中药组合物包含：太子参20-30份，半夏20-30份，茯苓16-24份，丹参56-84份，红花8-12份，黄连8-12份，陈皮8-12份，大黄32-48份，牛膝16-24份和甘草8-12份。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其中按重量份数计，所述中药组合物包含：太子参25份，半夏25份，茯苓20份，丹参70份，红花10份，黄连10份，陈皮10份，大黄40份，牛膝20份和甘草10份。

7.根据权利要求5或6所述的检测方法，其中所述半夏为法半夏。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的检测方法，其中所述中药组合物是肾衰宁胶囊。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的检测方法，其中所述高效液相色谱条件还包括：柱温为20-40℃；流速为每分钟0.95-1.05ml；紫外检测波长为250-260nm；理论板数按大黄素峰计算不低于4000。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其中所述高效液相色谱条件还包括柱温为40℃；流速为每分钟1ml；紫外检测波长为254nm。