[发明专利]CK试剂盒及其制作工艺

说明书

本发明涉及一种CK试剂盒及其制作工艺，其特征在于，包含试剂R1和试剂R2，试剂R1包括以下浓度组分：咪唑：5g/L，NAC：5g/L，AMP：10g/L，Ap5A：10mg/L，葡萄糖：10g/L，NADP：2g/L，HK：2.5ku/L，试剂R2包括以下浓度组分：咪唑：5g/L，ADP：5g/L，磷酸肌酸：50g/L，G6P‑DH：5ku/L，保护剂：1‑2g/L。本发明的有益效果在于：与BSA作为稳定剂相比稳定性可以延长6个月。

技术领域

本发明涉及试剂盒技术领域，具体的说是一种CK试剂盒。

背景技术

肌酸激酶(Creatine Kinase，CK)，也称为肌酸磷酸激酶。肌酸激酶以骨骼肌、心肌、平滑肌含量为多，其次是脑组织，胃肠道、肺和肾内含量较少。肌酸激酶主要存在于细胞质和线粒体中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。肌酸激酶活性测定可以用于骨骼肌疾病及心肌疾病的诊断。

现有技术中，肌酸激酶检测试剂盒(DGKC法)，是常用的一种检验方法。适用于医学临床上检测肌酸激酶的活性，仅用于体外诊断。其主要成分：

试剂1：咪唑100mmol/l、乙酸镁10mmol/l、葡萄糖20mmol/l。

试剂2：N－乙酰半胱氨酸20mmol/l、EDTA2mmol/l、ADP2mmol/l、NADP2mmol/l、AMP5mmol/l、腺苷(5＇)五磷酸(5＇)－腺苷10μmol/l、葡萄糖－6－磷酸脱氢酶≧1.5KU/l、己糖激酶≧2.5KU/l。

试剂3：磷酸肌酸30mmol/l。

目前多数企业的CK试剂盒的配方多分装日本东洋纺原料，稳定性至少达到18个月，其他企业使用国产原料，而且稳定只能达到12个月，而且反应无法到终点。

我们按照上述配方配制成试剂2，发现R2在保存12个月时，使用之前校准的结果测量质控品，发现其试剂的灵敏度下降了20％以上，再通过与新配制的试剂进行比较发现，试剂的稳定性是由于试剂2的问题，再进一步对试剂都是很分析发现是葡萄糖－6－磷酸脱氢酶活性下降导致。因为在对试剂2成分进行分析时，没有发现该酶分解，因此推测是其三维结构发现了改变。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种配方改良的CK试剂盒以及CK试剂盒(DGKC优化比色法液体双试剂)制作工艺。

本发明是通过以下技术方案实现的：

设计一种CK试剂盒，其特征在于，包含试剂R1和试剂R2，

试剂R1包括以下浓度组分：

咪唑：5g/L，NAC：5g/L，AMP：10g/L，Ap5A：10mg/L，葡萄糖：10g/L，NADP：2g/L，HK：2.5ku/L

试剂R2包括以下浓度组分：

咪唑：5g/L，ADP：5g/L，磷酸肌酸：50g/L

G6P-DH：5ku/L

保护剂：1-2g/L。

进一步的，保护剂CASSAG包含6个氨基酸的短肽。其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

进一步的，所述试剂R1与试剂R2的体积比为2:1。

一种CK试剂盒的制作工艺，其特征在于：包含以下步骤：

步骤一：对试剂R1各组分进行称量，加入溶剂中搅拌，搅拌均匀后静置，过滤并除去杂质；

步骤二：对试剂R2各组分进行称量，加入溶剂中搅拌，搅拌均匀后静置，过滤并除去杂质；

步骤三：半成品检验；