[发明专利]一种重组谷氨酸棒杆菌及其在生产2-吡咯烷酮中的应用有效
| 申请号： | 201911376514.6 | 申请日： | 2019-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN110951664B | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;马振锋;徐美娟;杨套伟;张显;邵明龙 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/77;C12P17/10;C12R1/15 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 谷氨酸 杆菌 及其 生产 吡咯烷酮 中的 应用 | ||
1.一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述重组谷氨酸棒杆菌以谷氨酸棒杆菌为宿主，敲除编码N-乙酰谷氨酸激酶的基因，且表达编码谷氨酸脱羧酶的基因和编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因；所述编码谷氨酸脱羧酶的基因的下游与编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因的上游之间连接有核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的调控基因。
2.如权利要求1所述的一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述编码N-乙酰谷氨酸激酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.如权利要求2所述的一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述编码谷氨酸脱羧酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
4.如权利要求3所述的一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
5.如权利要求1-4任一所述的一种重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述重组谷氨酸棒杆菌以谷氨酸棒杆菌为宿主，敲除编码N-乙酰谷氨酸激酶基因，且以pET-28a(+)质粒、pXMJ19质粒、pET-24b(+)质粒和/或pDXW-10质粒为载体表达编码谷氨酸脱羧酶的基因和编码β-丙氨酸CoA转移酶的基因。
6.一种生产2-吡咯烷酮的方法，其特征在于，所述方法为先将权利要求1-5任一所述的重组谷氨酸棒杆菌接种至含有葡萄糖的培养基中，于温度为28～35℃、转速为100～250rpm、pH为6～8的条件下进行发酵，获得含有2-吡咯烷酮的发酵液，然后将含有2-吡咯烷酮的发酵液进行提取，获得2-吡咯烷酮。
7.权利要求1-5任一所述的重组谷氨酸棒杆菌或权利要求6所述的方法在生产2-吡咯烷酮中的应用。
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