[发明专利]一种梅毒螺旋体检测引物及试剂盒在审
| 申请号: | 201911366837.7 | 申请日: | 2019-12-26 |
| 公开(公告)号: | CN110951897A | 公开(公告)日: | 2020-04-03 |
| 发明(设计)人: | 张惠丹;戴敬;节淳皓 | 申请(专利权)人: | 苏州德思普生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11 |
| 代理公司: | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人: | 刘召民 |
| 地址: | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 梅毒 螺旋体 检测 引物 试剂盒 | ||
1.一种梅毒螺旋体检测引物,包括检测梅毒螺旋体特异性的polA基因的上游引物polA-F和下游引物polA-R:
polA-F:5′-AGAAGGGAGGGCTAGTCCGGT-3′,
polA-R:5′-TAAGGTCAGTAACACCACTGG-3′。
2.根据权利要求1所述的一种梅毒螺旋体检测引物,其特征在于,还包括探针polA-P:5′-发光基团-TTGAAGTCAGTGAAGACGAGCA-淬灭基团-3′。
3.根据权利要求2所述的一种梅毒螺旋体检测引物,其特征在于,所述发光基团包括FAM,HEX,VIC,ROX,TAMARA,Cy3或Cy5,所述淬灭基团包括MGB、BHQ1、BHQ2或BHQ3。
4.一种梅毒螺旋体检测试剂盒,包括权利要求1-3任意一项所述的一种梅毒螺旋体检测引物。
5.根据权利要求4所述的一种梅毒螺旋体检测试剂盒,其特征在于,还包括:
PCR反应液、水、阴性参照物、阳性参照物以及定量标准品。
6.根据权利要求5所述的一种梅毒螺旋体检测试剂盒,其特征在于,所述阴性参照物由人类细胞系K-562基因组DNA制成,所述阳性参照物由包含梅毒螺旋体polA基因片段的质粒制成,所述定量标准品由包含梅毒螺旋体polA基因片段的质粒制成1copies/μL、100copies/μL、10000copies/μL。
7.根据权利要求5所述的一种梅毒螺旋体检测试剂盒,其特征在于,所述PCR反应液包括:PCR反应用缓冲液、0.2-0.3mM三磷酸碱基脱氧核苷酸混合液、4-6U耐热DNA聚合酶、4-6U尿嘧啶DNA糖基化酶、300-500nM上、下游引物和100-300nM探针。
8.根据权利要求7所述的一种梅毒螺旋体检测试剂盒,其特征在于,所述PCR反应用缓冲液包含20mM氯化钾、50mM的PH8.0 Tris-HCl、1.5mM二价镁离子。
9.根据权利要求5所述的一种梅毒螺旋体检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒还包括液滴生成液。
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