[发明专利]一种酵母菌细胞破壁的方法

说明书

本发明公开了一种酵母菌细胞破壁的方法，该方法使用复合酶制剂对酵母菌的细胞进行破壁，提取。所述的复合酶制剂为蜗牛酶、溶菌酶、甘露聚糖酶和葡聚糖酶的组合物。该本发明方法单批破壁时间由10h缩短至4h，酶生物活性由50％提高至95％以上。本发明所用的酶制剂添加量少，成本低，操作简单，效果明显。不但在短时间内达到较高的破壁效果，而且能较好的保持提取物质的生物活性。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及一种针对酵母菌细胞的高效无毒破壁的方法。

背景技术

从酵母细胞中提取生物活性物质如蛋白、酶、多肽或其他活性目标物质时，必须先破除其细胞壁。酵母的破壁方式主要有物理法和化学法。物理法主要采用高压匀浆、超声波、微波、挤压研磨等，但物理法要求设备条件高，过程中易产热使酶失活。化学法常采用有机溶剂、表面活性剂等，其虽然破壁效率好，但毒性大。不利于用于食品加工生产。

因此寻找一种高效无毒的酵母细胞破壁方法，以用于提取生物活性物质如蛋白，酶，多肽或其他活性目标物质，以及酵母食品加工行业生产的首要任务。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种高效无毒的酵母细胞破壁方式。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种酵母菌细胞破壁的方法，该方法使用复合酶制剂对酵母菌的细胞进行破壁，提取。

其中，所述的酵母菌为酿酒酵母属、假丝酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、球拟酵母属和酒香酵母属中的任意一种，优选酿酒酵母属。

其中，所述的复合酶制剂为蜗牛酶、溶菌酶、甘露聚糖酶和葡聚糖酶的组合物。

其中，所述的复合酶为蜗牛酶、溶菌酶，甘露聚糖酶和葡聚糖酶按比例复合。

优选地，所述的复合酶制剂中各组分的质量分数为：蜗牛酶5％～30％，溶菌酶50％～80％，甘露聚糖酶5％～30％，葡聚糖酶5％～30％。

更优选地，所述的复合酶制剂中各组分的质量分数优选为：蜗牛酶5％，溶菌酶70％，甘露聚糖酶10％，葡聚糖酶15％。

其中，蜗牛酶的酶活为10000U/g，溶菌酶的酶活为20000U/g，甘露聚糖酶的酶活为500000U/g，葡聚糖酶的酶活为10000U/g。

上述酵母菌细胞破壁的方法包括如下步骤：将酵母菌加入缓冲溶液中，再向其中加入复合酶制剂，震荡破壁，即得破壁处理后的酶液。

其中，所述的缓冲溶液为3-5％磷酸二氢钠溶液，缓冲溶液的pH值为4～9。

其中，所述酵母菌的浓度为0.1～1g/mL，优选0.2g/mL。

其中，复合酶制剂的添加量为0.001～1g/L，优选0.01～0.08g/L，更优选0.01～0.03g/L。

其中，震荡破壁的pH值为4～9，温度为15～70℃，时间为40min～10h，优选60min。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：

本发明通过添加复合酶进行酵母破壁，破壁时间由10h缩短至4h；在破壁时间4h后，活性物质相对释放率可达到95％以上。该方法可以显著的缩短酵母破壁工时提高生物活性物质，所用的破壁剂高效无毒，加量少，成本低，操作简单，效果明显，减少生产成本。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。