[发明专利]具有人源化程序性细胞死亡1基因的非人动物

权利要求书

1.一种啮齿动物基因组，其包含在内源程序性细胞死亡1(Pdcd1)基因座上的人源化程序性细胞死亡1(Pdcd1)基因，其中所述人源化Pdcd1基因编码包含人部分和内源部分的人源化程序性细胞死亡1(PD-1)多肽，其中所述人部分包含对应于人PD-1多肽的N端免疫球蛋白V结构域的序列，并且所述内源部分包含内源啮齿动物PD-1多肽的胞内部分，并且其中所述啮齿动物是小鼠或大鼠。

2.权利要求1的啮齿动物基因组，其中所述人源化PD-1多肽

(a)由啮齿动物信号肽翻译；或

(b)还包含内源啮齿动物PD-1多肽的跨膜部分。

3.一种制备啮齿动物的方法，所述方法包括：

修饰啮齿动物的基因组，使得其包含在内源Pdcd1基因座上的人源化Pdcd1基因，其中所述啮齿动物从所述人源化Pdcd1基因表达包含人部分和内源部分的人源化PD-1多肽，其中所述人部分包含对应于人PD-1多肽的N端免疫球蛋白V结构域的序列，并且所述内源部分包含内源啮齿动物PD-1多肽的胞内部分，并且其中所述啮齿动物是小鼠或大鼠。

4.一种制备啮齿动物的方法，所述方法包括：

(a)将人基因组片段插入啮齿动物胚胎干细胞的内源Pdcd1基因座上的内源啮齿动物Pdcd1基因中，以形成编码人源化PD-1多肽的人源化Pdcd1基因，其中所述人源化PD-1多肽包含人部分和内源部分，其中所述人部分包含对应于人PD-1多肽的N端免疫球蛋白V结构域的序列，并且所述内源部分包含内源啮齿动物PD-1多肽的胞内部分，并且其中所述啮齿动物是小鼠或大鼠，

(b)获得(a)中产生的所述啮齿动物胚胎干细胞；和

(c)使用(b)的所述啮齿动物胚胎干细胞形成啮齿动物。

5.权利要求4的方法，其中所述人源化PD-1多肽

(a)由啮齿动物信号肽翻译；或

(b)还包含内源啮齿动物PD-1多肽的跨膜部分。

6.权利要求4或5的方法，其中所述人部分包含人PD-1多肽的氨基酸35-145、27-145或26-169。

7.权利要求4或5的方法，其中所述人源化Pdcd1基因包含内源Pdcd1外显子1、4和5，并且任选地所述人源化Pdcd1基因还包含全部或部分的内源Pdcd1外显子3。

8.一种制备啮齿动物胚胎干(ES)细胞的方法，所述方法包括：

将人基因组片段插入啮齿动物ES细胞的内源Pdcd1基因座上的内源啮齿动物Pdcd1基因中，以形成编码人源化PD-1多肽的人源化Pdcd1基因，其中所述人源化PD-1多肽包含人部分和内源部分，其中所述人部分包含对应于人PD-1多肽的N端免疫球蛋白V结构域的序列，并且所述内源部分包含内源啮齿动物PD-1多肽的胞内部分，并且其中所述啮齿动物是小鼠或大鼠。

9.一种评估靶向人PD-1的药物的药动学特性的方法，所述方法包括下列步骤：

向啮齿动物施用所述药物，所述啮齿动物包含根据权利要求1-6中任一项的啮齿动物基因组；和

进行测定以确定所述靶向人PD-1的药物的一种或多种药动学特性，其中所述药物任选是抗PD-1抗体。

10.一种啮齿动物肿瘤模型，其通过下列步骤获得：

(a)提供啮齿动物，所述啮齿动物包含根据权利要求1-6中任一项的啮齿动物基因组；和

(b)将一种或多种肿瘤细胞植入(a)的所述啮齿动物中；

从而提供所述啮齿动物肿瘤模型。