[发明专利]HOXD9在外周神经损伤后的表达量检测方法及HOXD9基因的应用

权利要求书

1.一种HOXD9基因的应用，其特征在于，用于制备促神经再生药物。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，HOXD9在外周神经损伤后的表达量检测方法包括如下步骤：

（1）通过取不同时间点坐骨神经夹伤的SD大鼠L4-6背根神经节，置于无Ca₂+/Mg₂+-Hibernate A中，剪去多余组织后转入1mg/mL胶原酶中，37℃消化90min，再用0.25%胰酶37℃消化15min，加入终止液终止反应，用1mL枪头吹打，充分混匀，离心，900rpm×5min；弃上清，15%BSA离心2次，900rpm×5min；弃上清，加入培养基，混匀细胞，过200目筛网，最后得到较纯的DRG神经元；将细胞快速冻存，待所有时间点收齐后，进行核蛋白分离和转录因子活性检测，确定转录因子HOXD9在神经再生过程中表达量变化趋势；

（2）应用PCR技术，观察HOXD9的相关信使RNA结果表达量及表达趋势；

（3）采用免疫荧光染色方法，在DRG神经元中显示HOXD9的胞内定位；

（4）统计大鼠坐骨神经损伤后不同时间点的荧光强度变化趋势，3天时荧光强度达到最亮，与PCR实验获得的结果趋势一致。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（1）中的时间点包括0h、15min、30min、3h、12h、1d和3d。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（1）中所用终止液为含10% FBS的PBS溶液。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（1）中SD大鼠的重量为180～220g。