[发明专利]一种前导肽突变体及其在角蛋白酶生产中的应用有效
| 申请号： | 201911153529.6 | 申请日： | 2019-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN110846299B | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 张娟;彭政;陈坚;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/54 | 分类号： | C12N9/54;C12N15/57;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 前导 突变体 及其 角蛋白 生产 中的 应用 | ||
1.一种角蛋白酶突变体，其特征在于，所述角蛋白酶突变体由信号肽、前导肽突变体和角蛋白酶组成；
信号肽的氨基酸序列、前导肽突变体的氨基酸序列以及角蛋白酶的氨基酸序列依次串联；
所述前导肽突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的前导肽的第76位亮氨酸突变为丙氨酸、第76位亮氨酸突变为缬氨酸、第76位亮氨酸突变为蛋氨酸或第76位亮氨酸突变为苯丙氨酸得到的；
所述角蛋白酶的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示；
所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。
2.编码权利要求1所述角蛋白酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。
4.携带权利要求2所述基因或权利要求3所述重组质粒的宿主细胞。
5.一种生产角蛋白酶的方法，其特征在于，所述方法为将权利要求4所述宿主细胞接种至发酵培养基中进行发酵，获得发酵液；将发酵液进行离心，获得发酵上清液；将发酵上清液进行提取，获得角蛋白酶。
6.如权利要求5所述的一种生产角蛋白酶的方法，其特征在于，所述发酵培养基的成分包含蛋白胨20 g/L、酵母粉10 g/L、蔗糖20 g/L、KH2PO4 3 g/L、Na2HPO4 6 g/L以及MgSO40.3 g/L。
7.权利要求1所述角蛋白酶突变体、权利要求2所述基因、权利要求3所述重组质粒、权利要求4所述宿主细胞或权利要求5或6所述方法在生产角蛋白酶方面的应用。
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