[发明专利]一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记及鉴别方法和应用

说明书

本发明公开了一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的分子标记，上游引物GLMI001‑F、GLMI002‑F及GLMI003‑F核苷酸序列分别如SEQ.ID No1、SEQ.ID No3、SEQ.ID No5所示，下游引物GLMI001‑R、GLMI002‑R及GLMI003‑R核苷酸序列分别如SEQ.ID No2、SEQ.ID No4及SEQ.ID No6所示。本特异性分子标记GLMI001、GLMI002和GLMI003用于紫灵芝和赤灵芝菌种的鉴定检测，规范灵芝菌种市场，检测掺假行为，保证灵芝药材安全；还可用于灵芝产品的检测，对于保证灵芝种质纯度，提高生产效率，具有很大的应用潜力和较好的经济价值。

技术领域

本发明属于灵芝菌种分子鉴定技术领域，具体涉及一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记及鉴别方法和应用。

背景技术

灵芝在分类地位上隶属于真菌界、担子菌门、伞菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属，广泛分布在热带和亚热带地区。我国灵芝种质资源丰富，广泛分布于吉林、河北、山西、河南、浙江、云南、贵州、广东和广西等省份。灵芝是我国传统中药材，有“九大仙草”之一的美称，性微温，气味特殊，味微苦涩。灵芝在《中华人民共和国药典(2015版)》中以灵芝属真菌赤灵芝(Ganoderma lucidum)或紫灵芝(Ganoderma sinense)的干燥子实体入药，其化学成分较为复杂，主要含有三萜类、多糖类、氨基酸多肽类、核苷类、呋喃类、生物碱类、油脂类及其微量元素类等，具有多种生理活性和药理活性，如调节免疫、预防心血管系统疾病、抗肿瘤、抗病毒、降血糖和抗氧化等。但赤灵芝性温而紫灵芝性平；赤灵芝适合入药，紫灵芝适合日常保健和调理。而且相对于赤灵芝，紫灵芝更昂贵。

随着人民生活水平的提高，对高品质灵芝的需求越来越大，所以现在越来越多的灵芝都是仿野生栽培，这也促进了灵芝优良品种的菌种培育、保藏和生产。当前有部分商家为获取暴利未按《食用菌菌种管理办法》进行生产和销售，再加上灵芝的长期栽培以及杂交育种等导致灵芝分类混乱，菌种名称不统一，很大程度上阻碍了灵芝产业的健康发展。作为灵芝产业中主要的两个种，紫灵芝和赤灵芝在子实体阶段通过外形容易区分，但是在菌种时期，两者几乎完全一样，因此需要利用分子手段进行区分，从而保障灵芝产业的健康有序发展。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明设计的目的是为了规范灵芝菌种培育、保藏和生产，提供一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的分子标记及鉴别方法和应用。

本发明通过以下技术方案加以实现：

一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记，该特异性分子标记的引物为GLMI001、GLMI002和GLMI003，各引物核苷酸序列如下：

上游引物GLMI001-F：5’-ACCCGGTGAAACAACA-3’，如SEQ ID No.1所示；

下游引物GLMI001-R：5’-GCAGTGAGTTTGGCTTAT-3’，如SEQ ID No.2所示；

上游引物GLMI002-F：5’-CGGACAGCGAACAGACG-3’，如SEQ ID No.3所示；

下游引物GLMI002-R：5’-GGCAGCAATGAGGACACC-3’，如SEQ ID No.4所示；

上游引物GLMI003-F：5’-AGCGACGCCGTCAACTC-3’，如SEQ ID No.5所示；

下游引物GLMI003-R：5’-AAGCAGCCACAGCCAACT-3’，如SEQ ID No.6所示。