[发明专利]识别猪ROSA26基因的sgRNA及其编码DNA、基因编辑方法、试剂盒和应用在审
| 申请号： | 201910856237.2 | 申请日： | 2019-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN110484538A | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 刘志国;李奎;牟玉莲 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/11;C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 11463 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 李双艳<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 100000 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基因 敲除 基因工程技术 特异性识别 非特异性 特异性强 有效减少 编码DNA 基因组 内含子 试剂盒 切割 应用 配合 | ||
1.特异性识别猪ROSA26基因的sgRNA，所述sgRNA用于CRISPR/Cpf1系统；所述sgRNA含有如SEQ ID NO.1所示序列，所述SEQ ID NO.1所示序列负责识别靶片段。
2.根据权利要求1所述的特异性识别猪ROSA26基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA含有如SEQ ID NO.3所示序列。
3.根据权利要求1或2所述的特异性识别猪ROSA26基因的sgRNA，其特征在于，所述猪ROSA26基因的第1内含子含有如SEQ ID NO.5所示序列。
4.含有编码权利要求1-3任一项所述的sgRNA的序列的DNA分子。
5.根据权利要求4所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子含有如SEQ ID NO.2所示序列，所述SEQ ID NO.2编码所述sgRNA负责识别靶片段的部分。
6.根据权利要求4所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子含有如SEQ ID NO.4所示序列，所述SEQ ID NO.4编码全长所述sgRNA。
7.对猪基因组中ROSA26基因进行基因编辑的方法，其特征在于，所述方法包括将(a)和(b)导入猪源生物材料中，以对猪基因组中ROSA26基因进行编辑；
(a)权利要求1-3任一项所述的sgRNA或权利要求4-6任一项所述的DNA分子；
(b)Cpf1分子，所述Cpf1分子包括Cpf1蛋白分子或Cpf1核酸分子。
8.试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-3任一项所述的sgRNA，或权利要求4-6任一项所述的DNA分子。
9.权利要求1-3任一项所述的sgRNA、权利要求4-6任一项所述的DNA分子、权利要求7所述的方法或权利要求8所述的试剂盒在对猪进行基因编辑中的应用。
10.权利要求1-3任一项所述的sgRNA、权利要求4-6任一项所述的DNA分子或权利要求9所述的试剂盒在制备对猪进行基因编辑的产品中的应用。
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