[发明专利]一种液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法

说明书

本发明公开了一种液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，涉及微生物发酵技术领域，方法包括(1)酿酒酵母和米曲霉茄氏瓶斜面种子培养；(2)酿酒酵母和米曲霉的混合种子液的培养；(3)酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液的生产；(4)酿酒酵母和米曲霉复合制剂的制备。本发明利用酿酒酵母和米曲霉混合发酵的工艺，在发酵生产酵母菌剂的同时还生产蛋白酶、淀粉酶等生物活性物质，有效降低了总的综合生产成本，提高了本发明产品的应用优势，可促进其在畜禽、水产饲料水产企业中的应用。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种以米曲霉和酿酒酵母混合液体发酵的工艺来生产饲用酿酒酵母和蛋白酶及淀粉酶复合制剂的方法。

背景技术

酿酒酵母(Saccharomyces cercvisiae)是一种可食用微生物，是一种兼性好氧微生物，在有氧和厌氧条件下均能生长，也是常用的微生态制剂菌种。饲料中添加酵母对饲养的动物的生长性能有积极影响。酿酒酵母具有较强的耐酸性，可以耐受一般饲料中酸化剂的添加剂量，能通过胃酸的考验，达到肠道。在动物肠道生长繁殖过程中能利用糖产生酸，促进肠道pH下降，能有效降低动物肠道中的有害的致病微生物的数量，可有效抑制养殖动物消化道内病原菌，吸附鞭毛有害菌，维护肠道健康；预防和治疗母猪便秘、产后无乳症、提高采食减少母猪体重损失；可以促进肠道上皮细胞增殖及成熟，从而提高营养物质的消化、吸收能力；并且促进肠粘膜产生免疫球蛋白，提高免疫力。夏天热应激等因素都可能导致菌丛不平衡和抑制上皮细胞发育，危害动物健康，酿酒酵母可以缓解热应激对动物消化道的负面影响。酿酒酵母菌属真菌类，常规的治疗用抗生素对真菌不起作用，可以与抗生素并用，还可以改善抗生素带来的肠道菌群失衡等不良影响，同时该菌的发酵培养物中除包含有酵母细胞和细胞外的代谢产物及自溶产物如肽、有机酸、寡糖、氨基酸、增味物质和芳香物质等，这些物质能显著改善动物健康状态.因此，酿酒酵母在饲料工业中具有广泛的应用前景。

米曲霉是一种蛋白质分解能力较强的微生物，传统的酱油发酵生产菌种，发酵培养能产生中性蛋白酶、酸性蛋白酶等物质，能将大分子蛋白质变成小分子氨基酸和肽。米曲霉是同时还具有生产淀粉酶的特性，一些食品工业生产中使用的真菌淀粉酶就是米曲霉生产的，淀粉酶能将大分子淀粉分解成小分子葡萄糖，我国养殖饲料日粮中是以豆粕-玉米型为主，在豆粕-玉米型日粮中添加蛋白酶和淀粉酶有助提高豆粕和玉米的消化吸收，特别是在断奶仔猪中，由于仔猪的消化系统发育不完善，添加蛋白酶和淀粉酶对提高仔猪对日粮营养物质的消化吸收和减轻腹泻具有很好的作用。

酵母发酵培养物作为饲料添加剂在市场上已有多种产品，蛋白酶或淀粉酶作为饲料添加剂也都有产品，但将酿酒酵母与米曲霉混合发酵生产活性酿酒酵母菌以及蛋白酶和淀粉酶作为饲料添加剂及其制备方法尚未见有报道。

发明内容

本发明目的在于，针对目前饲用酿酒酵母生产方式和饲用酶制剂的生产方式，提供一种以价格低廉、材料易得的农副产品为原料，辅以合理的发酵工艺，在达到生产饲用酿酒酵母的同时，还发酵生产饲用蛋白酶以及淀粉酶的方法。

本发明目的通过以下技术方案来实现：

一种液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，包括以下步骤：

(1)酿酒酵母(Saccharomyces cercvisiae)和米曲霉(Aspergillus oryzae)的茄氏瓶斜面种子培养：将酿酒酵母和米曲霉的原始菌种分别接入到茄氏瓶斜面培养基上，斜面培养后得到各自的茄氏瓶斜面种子，备用；

(2)酿酒酵母和米曲霉的混合种子液的培养：将步骤(1)所得的3瓶酿酒酵母茄氏瓶斜面种子和2瓶米曲霉茄氏瓶斜面菌子，在无菌条件下每瓶加50mL无菌水洗脱，将洗脱液同时接入种子发酵罐中,种子发酵罐中装有种子培养基，经培养,得到混合种子液，备用；

(3)酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液的生产：取步骤(2)所得混合种子液接入装有生产发酵培养基的生产罐中，经发酵得到酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液；