[发明专利]一种液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法

权利要求书

1.一种液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)酿酒酵母(Saccharomyces cercvisiae)和米曲霉(Aspergillus oryzae)的茄氏瓶斜面种子培养：将酿酒酵母和米曲霉的原始菌种分别接入到茄氏瓶斜面培养基上，斜面培养后得到各自的茄氏瓶斜面种子，备用；

(2)酿酒酵母和米曲霉的混合种子液的培养：将步骤(1)所得的3瓶酿酒酵母茄氏瓶斜面种子和2瓶米曲霉茄氏瓶斜面菌子，在无菌条件下每瓶加50mL无菌水洗脱，将洗脱液同时接入种子发酵罐中,种子发酵罐中装有种子培养基，经培养,得到混合种子液，备用；

(3)酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液的生产：取步骤(2)所得混合种子液接入装有生产发酵培养基的生产罐中，经发酵得到酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液；

(4)酿酒酵母和米曲霉复合制剂的制备：将步骤(3)所得酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液与玉米芯粉混合进行吸附，烘干、粉碎；

或者，将酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液与全价饲料混合进行吸附，烘干、粉碎。

2.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(1)所述茄氏瓶斜面培养基均为固体PDA培养基，茄氏瓶斜面规格为250mL；步骤(1)所述酿酒酵母(Saccharomyces cercvisiae)保藏号为CICC No.31015，所述米曲霉(Aspergillusoryzae)保藏号为CICC No.2195。

3.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(1)所述斜面培养，酿酒酵母的培养温度为子30℃，培养时间为48h；米曲霉的培养温度为子30℃，培养时间为72h。

4.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(2)所述种子培养基配方为：豆粕粉25～35g/L，玉米粉20～30g/L，磷酸二氢钾5～8g/L，pH自然，121℃灭菌30min。

5.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(2)所述种子发酵罐容积为500升，其中种子培养基装量为350升。

6.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(2)所述培养，条件为：30℃，180～200rpm，通气量1∶0.4～0.6(V/V)，培养时间为16～20h。

7.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(3)所述生产发酵培养基配方为：豆粕粉35～45g/L，玉米粉35～45g/L，磷酸二氢钾8～12g/L，pH自然，121℃灭菌30min。

8.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(3)所述混合种子液接种到生产发酵培养基中的体积比为4～6％vol。

9.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(3)所述发酵，条件为32℃、200～220rpm、通气量1∶0.6～0.8(V/V)，发酵时间为24～28h。

10.根据权利要求1所述的液体发酵生产饲用菌酶复合制剂的方法，其特征在于：步骤(4)所述酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液与玉米芯粉的体积/质量比为1L/Kg；所述烘干，温度为40℃；步骤(4)所述酿酒酵母和米曲霉复合制剂发酵液与全价饲料的体积/质量比为1-3L/t。