[发明专利]一种大豆疫霉抑制剂及其制备方法

说明书

本发明提供一种大豆疫霉抑制剂及其制备方法，涉及植物病害生物防治领域，包括没食子酸丙酯，所述没食子酸丙酯作为食品添加剂主要用于食品的抗氧化作用，对大豆疫霉的值EC_50％仅为0.458mmol/L，即抑制率为50％时，没食子酸丙酯的浓度仅为0.458mmol/L，安全性较高。其抑制大豆疫霉危害主要来自两方面其一没食子酸丙酯抑制大豆疫霉的生长，其作用机理及靶位点，通过蛋白组学技术揭示大豆疫霉的抑制机理与脂肪转运与代谢、能量代谢和碳水化合物代谢等关键通路蛋白表达的大幅下调紧密相关；其二没食子酸丙酯可以激发植物的防卫反应，提高抗性基因表达量抵抗大豆疫霉的侵染。

技术领域

本发明涉及植物病害生物防治领域，尤其涉及一种大豆疫霉抑制剂及其制备方法。

背景技术

本发明涉及植物病害生物防治领域，尤其涉及一种大豆疫霉抑制剂及其制备方法。

背景技术

大豆疫霉病菌引起的大豆疫病是大豆生产中的毁灭性病害之一,是我国对外公布的一类植物检疫危险性病原真菌。该病菌以土壤传播为主，大豆疫霉病原真菌是典型的土壤习居菌，主要以抗逆性很强的卵孢子在土壤中和土壤中的寄主残体内越冬并长期生存。当田间温度和湿度适宜时,卵孢子打破休眠萌发产生孢子囊,雨后有积水时，孢子囊很快释放出大量游动孢子,游动孢子被雨水冲溅到寄土表面.或受寄主分泌物的吸引。朝根系游动并最终侵染寄主。目前的防治大豆疫霉的方法有如下几种：(1)选用对当地小种具抵抗力的抗病品种。(2)加强田间管理，及时深耕及中耕培土。雨后及时排除积水防止湿气滞留。(3)播种时沟施甲霜灵颗粒剂，使大豆根吸收防止根部侵染。(4)播种前种子重量0.3％的35％甲霜灵粉剂拌种。(5)必要时喷洒或浇灌25％甲霜灵可湿性粉剂800倍液、58％甲霜灵锰锌可湿性粉剂600倍液或64％杀毒矾可湿性粉剂900倍液。可知在大豆疫霉防治中甲霜灵或杀毒矾抑制大豆疫霉的生长作为主要防治手段，其作用机制为抑制RNA聚合酶从而抑制了RNA的生物合成。

而农药使用不当可对植物产生药害，引起人畜中毒，杀伤有益微生物，导致病原物产生抗药性，农药的高残留还可造成环境污染。

发明内容

本发明的目的在于提供一种大豆疫霉抑制剂及其制备方法，以解决上述技术问题。

本发明为解决上述技术问题，采用以下技术方案来实现：一种大豆疫霉抑制剂，包括没食子酸丙酯和癸醇，癸醇作为没食子酸丙酯的助溶剂，其用量比例为：0.1mg-0.3mg的癸醇：1-2mmol的没食子酸丙酯。

所述没食子酸丙酯采用超临界二氧化碳萃取方法，包括如下步骤：

(1)精确称取颗粒大小在2-5mm大小的赤芍粉1.3-1.8kg，将其加入17-22％的温度为6-8℃的纯水中，在5℃条件下放置50-70分钟，超临界二氧化碳萃取中，超临界二氧化碳提取压力为33-37MPa，提取时间为54-57分钟，二氧化碳流率为4.5-5.7L/min，即可提取出没食子酸丙酯粗提物；

(2)没食子酸丙酯纯化：将(3)中没食子酸丙酯粗提物按照1:5的质量比溶于85-90℃的热水中，用截留分子量10kDa的超滤膜超滤去大分子杂质；然后用旋转蒸发仪中浓缩至没食子酸丙酯含量大于20-50mg/L；

(3)结晶纯化与干燥：将(4)中的没食子酸丙酯转移到50ml的离心管中，4-6℃下放置12小时后有沉淀出现在离心管底部，在10000rpm/min下离心5分钟，去上清，液氮速冻沉淀后，在-60℃、真空度为45的真空条件下冷冻干燥，待干燥至粉末，即获得没食子酸丙酯。

所述没食子酸丙酯还可由没食子酸和丙醇在单宁酶的催化下制备，包括如下制备步骤：