[发明专利]合成呋喃酮及其衍生物葡萄糖苷的糖基转移酶突变体蛋白有效
| 申请号： | 201910705628.4 | 申请日： | 2019-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN110343681B | 公开（公告）日： | 2020-12-25 |
| 发明（设计）人： | 宋传奎;陈永先;高婷;余凤 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12P19/18;C12P19/60 |
| 代理公司： | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人： | 胡文莉 |
| 地址： | 230036 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 合成 呋喃 及其 衍生物 葡萄 糖苷 糖基转移酶 突变体 蛋白 | ||
1.一种合成呋喃酮及其衍生物葡萄糖苷的糖基转移酶突变体蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.编码SEQ ID No.3所示糖基转移酶突变体蛋白的核苷酸。
3.根据权利要求2所述的核苷酸，其特征在于，其碱基序列如SEQ ID No.4所示。
4.表达载体，其含有权利要求2或3所述的核苷酸片段。
5.基因工程菌，其含有权利要求4所述的表达载体。
6.权利要求1所述的糖基转移酶突变体蛋白或权利要求3所述的核苷酸或权利要求4所述的表达载体或权利要求5所述的基因工程菌在呋喃酮及其衍生物糖苷制备上的应用； 所述衍生物为2-乙基-4-羟基-5-甲基-3(2H)-呋喃酮或单甲基呋喃酮。
7.权利要求1所述的糖基转移酶突变体蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）以包含编码SEQ ID No.1所示氨基酸序列的核苷酸序列的质粒为模板，以SEQ IDNo.5和SEQ ID No.6所示的核苷酸序列为引物进行PCR，得到SEQ ID No.4所示的突变基因；
（2）将步骤（1）得到的突变基因进行原核表达；
（3）分离纯化得到氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的糖基转移酶突变体蛋白。
8.一种合成呋喃酮及其衍生物葡萄糖苷的方法，其特征在于，以SEQ ID No.3所示的糖基转移酶突变体蛋白为催化剂，以呋喃酮及其衍生物为底物进行催化反应生成相应的呋喃酮及其衍生物葡萄糖苷，所述衍生物为2-乙基-4-羟基-5-甲基-3(2H)-呋喃酮或单甲基呋喃酮。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，催化反应的温度30℃、pH值8.5。
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