[发明专利]一种嗜热链球菌IMAU20756及其应用

权利要求书

1.一种嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)IMAU20756在制备胞外多糖中的应用；

所述嗜热链球菌IMAU20756的保藏编号为CGMCC No.18067；所述IMAU20756菌株在M17培养基中所产胞外多糖EPS经纯化后包括两个主要组分：EPS-1a和EPS-3a，摩尔质量分别为1.572×10⁵Da和3.825×10⁵Da；且所述EPS-1a主要由葡萄糖、甘露糖和半乳糖构成，占EPS-1a质量的90％以上；所述EPS-3a主要由甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖构成，占EPS-3a质量的80.6％；

所述IMAU20756菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示；

所述胞外多糖的制备方法，由以下步骤组成：(1)将活化后的所述嗜热链球菌IMAU20756接种于M17培养基中培养36h后，灭活菌株，冷却后离心，得第一上清液；所述M17培养基中包括以下浓度的原料：17.5g/L大豆蛋白胨、5g/L葡萄糖、0.5g/L抗坏血酸钠、19g/Lβ-甘油磷酸钠和0.25g/L硫酸镁；

(2)将所述第一上清液与体积浓度为80％的三氯乙酸溶液混合，至所述混合后的混合液中三氯乙酸溶液的终体积浓度为4％，静置后离心，得第二上清液；

(3)将所述第二上清液取与体积浓度为95％的乙醇溶液混合，静置后离心，得沉淀；

(4)用去离子水将所述沉淀复溶，透析后干燥，得胞外多糖；

所述接种，按照以M17液体培养基重量计2％的接种量接种；

所述EPS-1a中葡萄糖、甘露糖和半乳糖三者的摩尔比为3.62：1：2.99；

所述EPS-3a中甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖三者的摩尔比为1.19：1：1.08；

所述EPS-1a和EPS-3a的糖环形式均为吡喃糖环且糖苷键构型为α型；

步骤(1)所述活化为将所述嗜热链球菌IMAU20756于活化培养基中传代3次；所述活化培养基中包括以下原料：重量百分含量为10％的脱脂粉乳粉培养基和酵母粉；

所述分离纯化包括依次进行的DEAE-Cellulose 52离子交换色谱分级纯化和Sepharose CL-6B凝胶柱层析纯化。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，每次所述传代均为将所述嗜热链球菌IMAU20756按照2％的接种量接种于所述活化培养基上进行传代，所述传代的温度为34℃，所述传代的培养时间为36h。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)所述离心的离心力均为12000g，所述离心的时间均为30min。

4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，步骤(3)所述第二上清液与体积浓度为95％的乙醇溶液的体积比为1:3。

5.根据权利要求1所述应用，其特征在于，在步骤(4)得所述胞外多糖后，还包括分离纯化。