[发明专利]一种可获取高质量固体核磁共振谱图的RNA固体样品制备方法及其结构检测方法

权利要求书

1.一种可获取高质量固体核磁共振谱图的RNA固体样品制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将至少一种¹⁵N和¹³C标记碱基的RNA样品在氘代缓冲液中升温退火，使其正确折叠；

(2)在步骤(1)所得RNA溶液中依次加入一价或者二价阳离子水溶液和2-3倍体积预冷的氘代无水乙醇；

(3)将步骤(2)所得体系于低温静置过夜，离心弃去上清液，用预冷的氘代乙醇溶液清洗底部沉淀，得到所述可获取高质量固体核磁共振谱图的RNA固体样品。

2.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述RNA样品由固相合成法、体外转录法或生物提取法制备获得。

3.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中固体RNA样品纯度大于90％，沉淀前，RNA样品浓度不小于10ng/μL。

4.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述阳离子水溶液为一价或二价阳离子水溶液，包括：氯化钠、氯化镁、醋酸钠、醋酸钾、醋酸氨或者氯化锂水溶液。

5.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述低温为-20℃-0℃。

6.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(3)中离心条件为9600g转速下离心3-10min。

7.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述氘代缓冲液，步骤(2)中所述氘代无水乙醇以及步骤(3)中所述氘代乙醇溶液氘代比例一致，氘代比例为50％-95％。

8.如权利要求7所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述氘代缓冲液，步骤(2)中所述氘代无水乙醇以及步骤(3)中所述氘代乙醇溶液氘代比例为75％。

9.如权利要求1-8任一所述制备方法所制备的RNA固体样品的结构检测方法，其特征在于，包括：使用固体核磁共振波谱仪对该样品进行检测和检测图谱的收集与分析。

10.如权利要求9所述检测方法，其特征在于，所述检测图谱包括：一维¹H-¹⁵N CP谱图，一维¹H-¹³C CP谱图，一维¹H-³¹P CP谱图，二维¹H-¹⁵N hNH谱图，二维¹H-¹³C hCH谱图，二维¹³C-¹⁵N hNC谱图，二维¹H-¹⁵N hCNH谱图，二维¹H-¹⁵N hCN(PAR)NH谱图，二维¹⁵N-¹³C TEDOR谱图或者二维¹³C-¹³C DARR谱图。