[发明专利]单核苷酸多态性rs976754检测他汀相关性肌病装置和应用

说明书

本发明提供了一种他汀相关性肌病检测装置，所述装置针对待测样本的单核苷酸多态性位点rs976754进行Massarray SNP分型检测，该装置包括以下组成机构：引物合成机构；样本检测定量机构；PCR反应机构；单碱基延伸反应机构；和计算机检测和分析机构。此位点的基因型对识别肌病高风险人群，早期调整用药具有重要的指导意义。对于需要服用他汀类降脂药物的患者，早期进行肌病风险基因的筛选，预测肌病发生的风险，并给予个体化用药指导，对降低药物不良反应的发生，原发病的预后转归及提升患者生存质量具有重要的意义。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种单核苷酸多态性rs976754检测他汀相关性肌病装置和应用。

背景技术

颅内动脉粥样硬化是缺血性脑血管病发生的独立危险因素，高血脂可促进动脉粥样硬化斑块的形成。而阿托伐他汀(atorvastatin)作为降脂治疗的一线用药能够竞争性抑制胆固醇合成限速酶3羟基-甲基戊二酞辅酶A(3-hydroxy-3methylglutaryl CoA,HMG-CoA)还原酶，使胆固醇合成减少，同时促进浓度依赖的LDL受体活性提高，加速LDL的分解代谢从而能显著降低血脂水平、稳定斑块，对缺血性脑血管病的预防非常有益。

通常阿托伐他汀的使用是有效和安全的，但是随着其在临床中的广泛应用，药物不良反应也随之出现。其中，最常见的不良反应就是他汀相关性肌病，包括良性肌痛、更为严重的肌炎以及危及生命的横纹肌溶解症在内的肌肉并发症。根据现有的文献，他汀相关性肌病的发生率约为5％。但是，这很可能低估了临床实践中的真实发生率。在随机抽取的门诊患者中所进行的临床观察表明，他汀类药物导致肌肉毒性的实际发生率为9％～27％。虽然大多数他汀相关性肌病并不会导致肌肉损伤或增加健康风险，但即使是良性肌痛也可影响患者的生活质量，并容易促使患者因此而中断治疗，增加脑缺血事件的发生风险。因此若能准确识别肌病高风险人群，并早期进行个体化用药治疗，可显著提高患者生存质量。

他汀相关性肌病的发生机制目前尚不明确，可能与遗传因素和非遗传因素有关。有资料显示年龄、性别、服药剂量及联合用药等非遗传因素在一定程度上与肌病发生风险相关，但遗传因素有可能是肌病发生的最重要的因素。他汀类药物在体内的代谢通路如下：药物经肠道CYP450超家族的CYP3A4、CYP3A5催化后生成活性和非活性代谢产物，原形药物和代谢产物主要通过肝细胞膜上的有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)转运入肝脏，少量可以直接经血流进入肝脏，进而发挥生物学效应，同时在肝脏内多种药物代谢酶的作用下进一步分解为其他有活性或无活性的代谢产物，最后经肝脏排泄或直接渗透入血经肾脏排泄。

由于他汀是在肝脏发挥生物学效应，而血中的药物浓度则与其不良反应的发生相关，一般认为随着他汀血药浓度的升高其不良反应的发生率也是增加的。从药物动力学角度来说，他汀类药物吸收、转运和代谢相关的基因变异均可能导致其血药浓度的升高而增加不良反应的发生率。目前研究较多的是SLCO1B1基因多态性与肌病发生的相关性。有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)为跨膜转运蛋白，主要分布于肝脏，是运输他汀类药物进入肝脏的主要运载蛋白，研究认为编码该蛋白的基因SLCO1B1多态性与他汀不良反应相关。有研究发现SLCO1B1c.521TC(rs4149056，splicing)突变引起氨基酸(p.174VA)的改变，从而导致OATP1B1转运活性降低，引起他汀在机体内的血药浓度升高，进而导致肌病等不良反应的发生。SLCO1B1c.521TC改变可作为肌病风险的独立遗传预测因子，基于大量临床研究，美国FDA对携带521C等位基因的患者采用降脂药物的种类及剂量进行了推荐。然而在临床实际工作中本发明人发现，未携带521C等位基因的患者在服药期间肌痛、肌无力或CK升高也时有发生。因此虽然SLCO1B1c.521TC的位点突变与肌病发生的关系已经得到证明，但是由于其作用有限，对患者该基因进行常规检测使临床获益的证据并不充分，且既往的研究多为白种人群，不同种族人群的基因频率和连锁状态存在很大不同，因此有必要对SLCO1B1其他SNP位点进行筛选，寻找肌病发生的遗传学病因，预测肌病发生风险，降低肌病的发生率。