[发明专利]一种海参糖胺聚糖含量的测定方法

权利要求书

1.一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：示差折光检测器与分子尺寸排阻—高效液相色谱仪联用，利用分子尺寸排阻凝胶色谱柱分离样品，示差折光检测器检测目标物信号，包括以下步骤：

一、标准曲线工作溶液配制：称取对照品，用高效液相色谱流动相配制成对照品储备液，再量取对照品储备液，用高效液相色谱流动相稀释成若干梯度浓度的标准曲线工作溶液，标准曲线工作溶液的浓度范围为0.1-30mg/mL；

二、供试品溶液配置：称取供试品，用高效液相色谱流动相配制成供试品溶液，供试品溶液浓度范围为0.1-30mg/mL；

三、仪器条件：采用一根或一根以上串联的分子尺寸排阻凝胶色谱柱；高效液相色谱流动相选自0.01 mol/L至0.3 mol/L的乙酸盐水溶液、0.01 mol/L至0.5 mol/L的硫酸盐水溶液、0.1 mol/L至1 mol/L的硝酸盐水溶液；高效液相色谱流动相流速0.1 mL/min -2 mL/min；示差折光检测器检测池与参比池温度、以及柱温箱温度均保持在25℃至50℃；

四、分析计算：将由对照品配置的标准曲线工作溶液按浓度由低到高的顺序注入分析，以对标准曲线工作溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；在相同分析条件下，将供试品溶液注入分析，得到相应的峰面积，依据标准曲线采用外标法得到供试品溶液中海参糖胺聚糖的浓度，该浓度与配制的供试品浓度的比值即为供试品中海参糖胺聚糖的含量。

2.根据权利要求1所述的一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：乙酸盐水溶液优选为乙酸铵水溶液，乙酸铵水溶液浓度优选为0.1 mol/L；硫酸盐水溶液优选为硫酸钠水溶液，硫酸钠水溶液浓度优选为0.2 mol/L；硝酸盐水溶液优选为硝酸锂水溶液，硝酸锂水溶液浓度优选为0.5 mol/L。

3.根据权利要求1或2所述的一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：供试品溶液浓度范围优选为1-10mg/mL。

4.根据权利要求1或2所述的一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：示差折光检测器检测池与参比池温度以及柱温箱温度优选为25℃至40℃。

5.根据权利要求1或2所述的一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：高效液相色谱流动相流速优选为0.4 mL/min -1 mL/min。

6.根据权利要求1或2所述的一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：分子尺寸排阻凝胶色谱柱，包括：TSKgel Guard Column SW_XL，TSKgel G4000SW_XL，TSKgelG3000SW_XL和TSKgel G2000SW_XL。

7.根据权利要求1或2所述的一种海参糖胺聚糖含量的测定方法，其特征在于：所述的供试品包括：海参糖胺聚糖以及解聚海参糖胺聚糖。