[发明专利]一种黑老虎直接坯体发生和植株再生的培养基及方法

说明书

本发明公开了一种黑老虎直接坯体发生和植株再生的培养基及方法，提出了以下步骤：S1，根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，S2，将S1中称好的琼脂加蒸馏水300～400毫升，加热并不断搅拌，S3，将S1中所取的各种物质(包括蔗糖)，加入煮好的琼脂中，再加水至1000毫升，S4，用1N的氢氧化钠或盐酸，滴入S3中的培养基里，每次只滴几滴，滴后搅拌均匀，S5，将配好的培养基，用漏斗分装到三角瓶中，并用棉塞塞紧瓶口，瓶壁写上号码，瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。本培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养，在国内外得到广泛应用，在组织培养中，由于无机盐的数量比较低，更适合木本植物的组织培养。

技术领域

本发明涉及黑老虎培育技术领域，尤其涉及一种黑老虎直接坯体发生和植株再生的培养基及方法。

背景技术

培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因此，在组织培养的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成，无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的；磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势，钙、钠、镁的需要则较少，培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供，微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。

现有技术中，由于市场对黑老虎的需求量日益增高，同时黑老虎的产量一直是比较固定的，所以我们有必要自作一种黑老虎直接坯体发生和植株再生的培养基，来增加其生长的进度和抗病的能力以满足人们的需求。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种黑老虎直接坯体发生和植株再生的培养基及方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种黑老虎直接坯体发生和植株再生的培养基及方法，包括以下步骤：

S1，根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。

S2，将S1中称好的琼脂加蒸馏水300～400毫升，加热并不断搅拌，直至煮沸溶解呈透明状，再停止加热。

S3，将S1中所取的各种物质(包括蔗糖)，加入煮好的琼脂中，再加水至1000毫升，搅拌均匀，配成培养基。

S4，用1N的氢氧化钠或盐酸，滴入S3中的培养基里，每次只滴几滴，滴后搅拌均匀，并用pH试纸测其pH值，直到将培养基的pH值调到5.8。

S5，将配好的培养基，用漏斗分装到三角瓶(或试管)中，并用棉塞塞紧瓶口，瓶壁写上号码，瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。

所述培养基的成分比较复杂，为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉，可以准备一份配制培养基的成分单，将培养基的全部成分和用量填写清楚，配制时，按表列内容顺序，按项按量称取，避免出现差错。

所述配制植物生长素时，先按要求浓度称好药品，置于小烧杯或容量瓶中，用1～2毫升0.1N(克当量浓度)氢氧化钠溶解，再加蒸馏水稀释至所需浓度，配制细胞分裂素时，应先用少量0.5或1N的盐酸溶解，然后加蒸馏水至所需量，以上各种所述混合液(母液)或单独配制药品，均放入冰箱中保存，以免变质、长霉，至于蔗糖、琼脂等，可按配方中要求，随称随用。