[发明专利]用于乳腺癌的试剂体系和试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于乳腺癌的试剂体系，其特征在于，所述的用于乳腺癌的试剂体系包括特异性引物和荧光定量PCR反应液；其中，特异性引物包括：

用于BCRA2扩增的引物序列1和引物序列2，引物序列1为：5’-tctccatttcccgcct-3’，引物序列2为：5’-cttactgtgaggatgg-3’；

用于Foxp3扩增的引物序列3和引物序列4，引物序列3为：5’-tttcttctcggtataaaa-3’,引物序列4为：5’-agggcccctgaccccccc-3’；

用于CXCR-6扩增的引物序列5和引物序列6，引物序列5为：5’-aatgaagggagt-3’,引物序列6为：5’-gaacatttttta-3’。

2.如权利要求1所述的用于乳腺癌的试剂体系，其特征在于，所述荧光定量PCR反应液的组成包括：GreenⅠ、Taq DNA聚合酶、dNTP和缓冲液；其中，Taq DNA聚合酶的浓度为2.5U/μL，dNTP的浓度为2-5mM。

3.如权利要求2所述的用于乳腺癌的试剂体系，其特征在于，所述缓冲液的组成包括：100-120mM Tris-HCl、120-150mM氯化钾、10-15mM氯化镁、3-5mM甘油和1-3mM甜菜碱。

4.如权利要求3所述的用于乳腺癌的试剂体系，其特征在于，所述缓冲液的组成中还包括0.5-2.0mM硫柳汞。

5.如权利要求1-4任一项所述的用于乳腺癌的试剂体系，其特征在于，所述特异性引物的浓度均为1.0-1.5μM。

6.一种用于乳腺癌的试剂盒，其特征在于，所述用于乳腺癌的试剂盒包含权利要求1-5任一项所述的用于乳腺癌的试剂体系。

7.如权利要求6所述的用于乳腺癌的试剂盒，其特征在于，所述用于乳腺癌的试剂盒还包括去核酸酶的水以及标准品，所述标准品包括含有BCRA2的质粒，含有Foxp3的质粒，含有CXCR-6的质粒。

8.权利要求7所述的用于乳腺癌的试剂盒的应用，其特征在于，包括以下步骤：

提取样本DNA；

将样本DNA或者标准品、特异性引物加至荧光定量PCR反应液中，再加入去核酸酶的水以使总反应体系达到一定的体积，置于PCR仪上，设置参数，进行扩增；

分析结果。

9.如权利要求8所述的用于乳腺癌的试剂盒的应用，其特征在于，PCR仪的参数设置为：95℃1min，1个循环；95℃20s、60℃50s、72℃15s，40个循环；90℃2min，1个循环。

10.如权利要求8或9所述的用于乳腺癌的试剂盒的应用，其特征在于，提取样本DNA是指从被测个体的血浆中提取游离DNA。