[发明专利]一种菌群绝对定量方法及在中国白酒发酵过程中的应用

权利要求书

1.一种白酒发酵体系中菌群含量的绝对定量方法，其特征在于，所述方法是利用Lactobacillus sp.和/或Lactobacillus acetotolerans作为内标来进行绝对定量；当所有白酒发酵体系的待测样本中，都存在Lactobacillus sp.或Lactobacillus acetotolerans时，则用Lactobacillus sp.或Lactobacillus acetotolerans中的其中1个作为内标即可；当所有白酒发酵体系的待测样本中，部分没有Lactobacillus sp.时，该没有Lactobacillus sp.的待测样本使用Lactobacillus acetotolerans作为内标来进行绝对定量；当所有白酒发酵体系的待测样本中，部分没有Lactobacillus acetotolerans时，该没有Lactobacillus acetotolerans的待测样本使用Lactobacillus sp.作为内标来进行绝对定量；

所述白酒是如下任意一种或者多种：清香型白酒、浓香型白酒、酱香型白酒、芝麻香型白酒、豉香型白酒、馥郁香型白酒；

所述绝对定量方法，包括：（1）对待测样本中的内标进行绝对定量；（2）确定待测样本中，需要绝对定量的待测菌群与内标的相对含量；（3）根据（1）和（2），换算得到待测菌群的绝对含量；内标Lactobacillus acetotolerans的特异性引物为SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2；内标Lactobacillus sp.的特异性引物为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述白酒发酵体系的待测样本，为白酒发酵酒醅。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样本中，需要绝对定量的待测菌群，包括如下任意一种或者多种：总菌群、任意一个菌种，或者任意多个菌种。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述（1）中，对待测样本中的内标进行绝对定量是通过荧光定量PCR来实现。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述白酒发酵体系的待测样本，为白酒发酵酒醅；所述（1）中，对待测样本中的内标进行绝对定量是通过荧光定量PCR来实现。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样本中，需要绝对定量的待测菌群，包括如下任意一种或者多种：总菌群、任意一个菌种，或者任意多个菌种；所述（1）中，对待测样本中的内标进行绝对定量是通过荧光定量PCR来实现。

7.根据权利要求4-6任一所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR所用的引物为内标的特异性引物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，内标Lactobacillus acetotolerans的特异性引物是基于转录调控因子基因序列设计，基因序列NCBI登录号为WP_082137158.1；内标Lactobacillus sp.的特异性引物是基于16s rRNA基因序列设计，基因序列GeneBank编号为KU674948.1。