[发明专利]一种牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法

说明书

本发明属于生物医疗技术领域，公开了一种牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法。选择成年SD大鼠，采用全程低蛋白和限制饮食方法建立IUGR他胎鼠模型；IUGR胎鼠IGF2/H19印迹控制区组蛋白修饰测试；利用原位杂交检测脑缺血再灌注后脑组织神经干细胞因子mRNA的表达。本发明提供的牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法表明IUGR胎鼠SCF mRNA在皮质、纹状体和室旁区有微弱的表达；印记控制区组蛋白修饰水平发生改变是宫内发育迟缓仔鼠出现成年期代谢综合征的机制之一。

技术领域

本发明属于生物医疗技术领域，尤其涉及一种牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法。

背景技术

牛磺酸(Taurine)又称β-氨基乙磺酸，最早由牛黄中分离出来，故得名。纯品为无色或白色斜状晶体，无臭，牛磺酸化学性质稳定，不溶于乙醚等有机溶剂，是一种含硫的非蛋白氨基酸，在体内以游离状态存在，不参与体内蛋白的生物合成。牛磺酸虽然不参与蛋白质合成，但它却与胱氨酸、半胱氨酸的代谢密切相关。人体合成牛磺酸的半胱氨酸亚硫酸羧酶(CSAD)活性较低，主要依靠摄取食物中的牛磺酸来满足机体需要。胎儿生长受限(FGR)又称宫内生长受限(IUGR)，是指胎儿大小异常，在宫内未达到其遗传的生长潜能。胎儿出生体重低于同孕龄平均体重的两个标准差，或低于同龄正常体重的第10百分位数。鉴于并非所有低于第10百分位数的胎儿均为病理性生长受限，也有人提出以低于第3百分位数为准。我国发生率为6.39％，是围生儿死亡的第二大原因。死亡率为正常发育儿的6～10倍。在死亡中约占围生儿的30％，产时宫内缺氧围生儿中50％为FGR。然而，牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞作用尚不明。

综上所述，现有技术存在的问题是：牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞作用尚不明。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法。

本发明是这样实现的，一种牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法，所述的牛磺酸对IUGR胎鼠神经干细胞增殖的应用方法，包括以下步骤：

步骤一，采用全程低蛋白和限制饮食结合方法建立IUGR模型；

步骤二，IUGR胎鼠IGF2/H19印迹控制区组蛋白修饰测试；

步骤三，利用原位杂交检测IUGR胎鼠脑组织神经干细胞因子mRNA的表达。

进一步，所述步骤一中低蛋白和限制饮食结合方法建立IUGR模型，具体包括以下步骤：

(1)准备大鼠低蛋白饲料、牛磺酸饲料、标准饲料；

(2)暗室条件下将雌雄大鼠以5:2合笼，第二天早晨取阴道分泌物镜检，以发现精子确定为妊娠第1天即。

(3)将孕鼠随机分为对照组、IUGR组及IUGR+孕鼠补充牛磺酸组(牛磺酸组)，每组10只；

(4)IUGR组孕鼠自受孕之日到分娩当天正常组给予大鼠标准饲料，IUGR组和牛磺酸组给予低蛋白饲料且仅给予对照组饮食的25～35％的量喂养，牛磺酸组自妊娠第10天起饲料中添加牛磺酸饲料直至自然分娩。

进一步，所述步骤一中整个饲养过程中采用灌胃饲养，自由饮水，室内温度25℃±2℃，湿度65％～85％，12h明暗交替光照。

进一步，所述步骤二中低蛋白饲料，按照能量比例由蛋白质6％、碳水化合物75％、脂肪19％组成。

进一步，所述步骤二中IUGR大鼠IGF2/H19印迹控制区组蛋白修饰测试方法如下：

(1)采用妊娠期持续低蛋白和限制饮食的方法模拟宫内营养不良环境，至出生后减少限制饮食组每窝仔鼠数量为8只，正常对照组每组为8只，以构建宫内发育迟缓及生后追赶生长的大鼠模型；