[发明专利]一种含葡萄糖氧化酶和酿酒酵母的霉菌毒素生物降解剂及其应用

权利要求书

1.一种含葡萄糖氧化酶和酿酒酵母的霉菌毒素生物降解剂，其特征在于，是由质量比：葡萄糖氧化酶和酿酒酵母yk18发酵培养物1︰1～9混合均匀制成，霉菌毒素生物降解剂中葡萄糖氧化酶活力≥1000 u/g，酿酒酵母活菌数≥1.0×10⁸个/g；

所述的葡萄糖氧化酶为粉末状饲料添加剂葡萄糖氧化酶，酶活力≥5000 u/g，或液体饲料添加剂葡萄糖氧化酶，酶活力≥10000 u/mL；葡萄糖氧化酶的酶活力定义为在pH为6.0，温度为30℃的有氧条件下，每分钟催化1μmol的β-D-葡萄糖转化为D-葡萄糖酸和过氧化氢所需的酶量即为一个葡萄糖氧化酶酶活性单位（U）；

所述的酿酒酵母yk18为2018年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No：16598的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；

所述的酿酒酵母yk18发酵培养物的制备方法是：

a、生产菌种的制备：将低温保存的酿酒酵母yk18在平板种子培养基上活化，挑取单菌接种于含液体发酵培养基的试管中，32℃，200r/min摇床培养24小时后，以v/v计的2%转接于含液体发酵培养基的500ml的三角瓶中，32℃，200r/min摇床培养24h，得到酿酒酵母yk18发酵培养种子液；

b、液体深层有氧发酵：在1000ml的三角瓶加入液体发酵培养基300ml，按v/v计的5%添加量加入液体发酵种子液15mL，32℃，200r/min摇床培养24h，得到酿酒酵母yk18液体发酵培养液；

c、固体无氧发酵：在1000ml的三角瓶中加入固体发酵培养基200g，按质量比3％的添加量将酿酒酵母yk18液体发酵培养液6g加到含固体培养基的三角瓶中，用无菌玻璃棒搅拌均匀，密封瓶口，放于32℃恒温培养箱中培养48h，均匀散于瓷盘中，室温风干，粉碎过60-80目筛，经检测含酿酒酵母活菌≥2.5×10⁸个/g，即为酿酒酵母yk18发酵培养物；

所述的种子平板培养基是：将10g酵母膏和20g蛋白胨于900ml溶解于水中，加入20g琼脂粉，121℃灭菌20min，加入100ml 含20g葡萄糖灭菌溶液，调pH值6.5，制成斜面或平板培养基；

所述的种子液体培养基是： 将酵母膏10g和蛋白胨20g溶解在900ml水中，121℃灭菌20min，加入100ml 含20g葡萄糖灭菌溶液，调pH值6.5；

所述的液体发酵培养基是：称取麦芽汁培养基130.1g，加入蒸馏水或去离子水1000ml，搅拌加热煮沸至完全溶解，121℃灭菌20min；

所述的固体发酵培养基是：按质量配比麸皮∶玉米芯粉∶玉米粉∶豆粕粉＝4﹕2﹕2﹕2,按培养基干物质的总质量添加3%硫酸铵，加水使培养基含水量达到68%，pH值6.5，121℃灭菌60mi；所述的麸皮、玉米芯粉、玉米粉、豆粕粉均过80目筛，含水量﹤10.0%，其中麸皮：粗蛋白≥15.0%，粗纤维﹤9.0%，粗灰分﹤6.0%；玉米芯粉：粗蛋白≥2.2%，粗纤维﹤29.7%，粗灰分﹤6.0%；玉米粉：粗蛋白≥10.0%，粗纤维﹤9.0%，粗灰分﹤6.0%；豆粕粉：粗蛋白≥44.0%，粗纤维﹤5.0%，粗灰分﹤6.0%。

2.根据权利要求1所述的含葡萄糖氧化酶和酿酒酵母的霉菌毒素生物降解剂，其特征在于，由质量比的葡萄糖氧化酶和酿酒酵母yk18发酵培养物1∶1混合均匀，经检测，葡萄糖氧化酶活力≥1000 u/g，酿酒酵母活菌数≥1.0×10⁸个/g，即成霉菌毒素生物降解剂。

3.根据权利要求1所述的含葡萄糖氧化酶和酿酒酵母的霉菌毒素生物降解剂，其特征在于，由质量比的葡萄糖氧化酶和酿酒酵母yk18发酵培养物1∶4混合均匀，经检测，葡萄糖氧化酶活力≥1000 u/g，酿酒酵母活菌数≥1.0×10⁸个/g，即成霉菌毒素生物降解剂。