[发明专利]一种增强蛋清ACE抑制肽稳定性的方法

说明书

本发明公开了一种增强蛋清ACE抑制肽稳定性的方法，该方法属于纳米材料生物学领域，利用氧化石墨烯修饰蛋清ACE抑制肽，制备得到氧化石墨烯‑活性肽复合材料，其制备方法包括以下步骤：将氧化石墨烯加入水中，超声处理，得到其分散液，然后加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCl)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)进行活化，最后加入活性肽进行酰胺反应，将反应后的溶液离心除去杂质后冷冻干燥得到氧化石墨烯‑活性肽粉末。本发明制备得到的氧化石墨烯‑活性肽对ACE有持续稳定的抑制效果，具有良好的生物兼容性，同时发挥氧化石墨烯作为递送载体特性进而提高活性肽的稳定性，而且克服了活性肽在胃肠道不稳定的缺点，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种增强蛋清ACE抑制肽稳定性的方法。

背景技术

生物活性肽具有抗氧化、抗高血压、免疫调节和降血糖等生物功能，其中血管紧张素转化酶(angiotensin converting-I enzyme，ACE)抑制肽是一类重要的功能活性肽，通过抑制ACE活性而起到显著的降血压作用。然而大量实验证实活性肽不稳定，在体内容易被蛋白酶和肽酶降解，以某种方式克服胃肠降解实现ACE抑制肽以活性形式能够被小肠有效的吸收和足够剂量运输到靶器官的部位是目前需要解决的瓶颈的问题。

蛋清ACE抑制肽RVPSL在经模拟胃肠道体系其结构和活性都有所降低，为克服蛋清肽容易受胃肠道蛋白酶和肽酶的降解，对ACE抑制肽的稳态化修饰成为解决该瓶颈的一个思路。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明的目的是提供一种增强蛋清ACE抑制肽稳定性的方法。该方法过程快捷，且所制备的氧化石墨烯-活性肽复合材料具有良好的生物兼容性，而且克服了蛋清活性肽在胃肠道不稳定的缺点，能够以完整活性形式与靶点作用。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种增强蛋清ACE抑制肽稳定性的方法，包括以下步骤：

(1)将氧化石墨烯加入水中，超声处理，得到氧化石墨烯分散液；

(2)将偶联剂加入到步骤(1)得到的氧化石墨烯分散液(棕黄色)中，并搅拌至偶联剂全部溶解后加入活性肽进行酰胺反应得到反应液；

(3)将反应后的反应液离心后冷冻干燥，得到氧化石墨烯-活性肽复合材料。

进一步的，所述氧化石墨烯分散液中氧化石墨烯的质量浓度为0.1mg/mL-1mg/mL。

进一步的，所述超声处理的功率为30kHz-40kHz，处理时间为1-3h。

进一步的，所述偶联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺。

进一步的，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的质量与氧化石墨烯分散液的体积比为1∶2∶1g/mL，反应时间为5-7h。

进一步的，步骤(3)中所述离心条件为4000r/min-6000r/min，5-15min，并重复2-3次。

进一步的，所述活性肽序列为RVPSL。

一种氧化石墨烯-活性肽复合材料，所述氧化石墨烯-活性肽复合材料由上述的方法制备得到。

本发明相比现有技术的有益效果为：

1、本发明所述的增强蛋清ACE抑制肽稳定性的方法中，将活性肽和氧化石墨烯分散液通过加入偶联剂进行酰胺反应进行键合，制备方法便捷，成本低，应用范围广；