[发明专利]一种从黄酒中提取谷胱甘肽的方法

说明书

本发明公开了一种从黄酒中提取谷胱甘肽的方法，其包括蛋白沉淀、第一清液制备、谷胱甘肽沉淀、第二清液制备、谷胱甘肽纯化、谷胱甘肽结晶6个步骤。本发明的有益效果在于：在黄酒中加入一定量的强酸，从而提高谷胱甘肽的收率，同时也使发酵液中的蛋白质变性沉淀，降低了谷胱甘肽在铜盐沉淀过程中未知杂质的干扰。本发明的方法既增强了菌体破壁的效果提高收率，又降低了铜盐沉淀过程中杂质的干扰提高纯度。本发明从黄酒中提取的高浓度、高纯度谷胱甘肽功能性成分，具有辅助抑制酒精性肝损伤、药物性肾损伤、消除人体自由基，提高人体免疫力及防止溶血具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物化工领域，具体涉及一种从黄酒中提取谷胱甘肽的方法。

背景技术

黄酒是以谷物为主要原料，利用麦曲、酒药中酵母菌等多种微生物的共同作用，经过一段时间酿制而成的发酵酒。随着人民生活水平的提高和消费意识的转变，作为低度、营养、保健型的酿造酒，黄酒正适合当今社会新的消费价值取向。黄酒里含有丰富的碳水化合物、氨基酸、维生素、微量元素以及多种活性物质，不仅成为中国传统的保健养生佳品，而且还被用作为中药服药的引子，被视为“百药之长”。黄酒中含有具有抗氧化功能的酚类物质、类黑精、谷胱甘肽及微量元素等物质，对功能性黄酒的研宄不仅丰富了黄酒的种类，还为开发具有保健功能的产品提供了参考，具有深远的意义。

谷胱甘肽(简称GSH)是一种广泛分布于动、植物和微生物细胞中的一种具有重要生理功能的活性三肽。GSH在动植物和微生物细胞中直接或间接参与蛋白质和DNA的合成、物质的运输、酶的活性、新陈代谢及细胞的保护等，研究表明，谷胱甘肽还具有抑制酒精性肝损伤、保护肝细胞膜、促进肝脏酶活性等作用。谷胱甘肽是一种胞内产物，主要的生产方法有提取法、化学合成法、发酵法和酶法，发酵法生产谷胱甘肽的研究主要包括高产菌种选育(或利用基因工程技术构建)、培养基组成的优化、发酵工艺条件的优化及控制等。将黄酒中丰富的谷胱甘肽成分提取出来，对实现我国谷胱甘肽大规模产业化，改变谷胱甘肽原料依赖进口的尴尬局面并推动我国医学工业、保健行业和食品工业的发展有着十分重要的意义，同时具有良好的经济效益和社会效益，因此研发一种从黄酒中提取谷胱甘肽的方法具有重要意义。现有技术中，尚未有从黄酒中提取谷胱甘肽的先例。

发明内容

为了实现本发明目的，本发明提供从黄酒中提取谷胱甘肽的方法，使得所提取的谷胱甘肽收率更高的同时也易于操作和工业生产。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：从黄酒中提取谷胱甘肽的方法，包括如下步骤：

(1)蛋白沉淀步骤：将富含谷胱甘肽的黄酒及黄酒糟加入强酸后搅拌沉淀，使富含谷胱甘肽的黄酒及黄酒糟充分溶解并沉淀蛋白得到第一匀浆；

(2)第一清液制备步骤：将步骤(1)制得的所述第一匀浆用酸调节pH后离心过滤，得到第一清液；

(3)谷胱甘肽沉淀步骤：向步骤(2)制得的第一清液中加入沉淀剂后搅拌反应，使谷胱甘肽形成沉淀后离心，收集清洗沉淀；

(4)第二清液制备步骤：收集步骤(3)制得的清洗沉淀并用纯化水悬起形成第二匀浆，在所述第二匀浆中加入硫化物，搅拌反应，使谷胱甘肽重新游离至上清液中，得到第二清液；

(5)谷胱甘肽纯化步骤：在步骤(4)中所述的第二清液中加入活性炭脱色并离心过滤，得到第三清液后减压浓缩，制得谷胱甘肽浓缩液；

(6)谷胱甘肽结晶步骤:采用乙醇溶液对步骤(5)制得的谷胱甘肽浓缩液进行结晶操作，得到谷胱甘肽晶体粗品后真空干燥得纯品。

优选地，所述步骤(1)中所述的强酸包括2,4,6-三硝基苯甲酸、乙二酸、2,4,6-三硝基苯酚、甲磺酸、苯磺酸中的任意一种或两种以上的混合。

优选地，所述步骤(1)中所述的强酸的加入量以所述第一匀浆的体积为基准，加入量的范围为0.1％～0.9％。