[发明专利]具有突变的CD28共刺激性结构域的嵌合抗原受体

权利要求书

1.嵌合抗原受体(CAR)多肽，包含配体结合结构域、跨膜结构域、细胞内信号传导结构域和共刺激信号传导区域，其中所述共刺激信号传导区域包含增强CAR-T细胞融合的CD28的细胞质结构域的突变形式。

2.根据权利要求1所述的多肽，其中所述共刺激信号传导区域包含缺乏YMNM亚结构域或在所述YMNM亚结构域中具有无效突变的CD28的细胞质结构域。

3.根据权利要求1或2所述的多肽，其中所述共刺激信号传导区域包含缺乏PRRP亚结构域或在所述PRRP亚结构域中具有无效突变的CD28的细胞质结构域。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的多肽，其中所述共刺激信号传导区域包含缺乏PYAP亚结构域或在所述PYAP亚结构域中具有无效突变的CD28的细胞质结构域。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的多肽，其中所述CAR多肽由下式限定：

SP–TAA–HG–TM–CSR–ISD；或

SP–TAA–HG–TM–ISD–CSR

其中“SP”表示信号肽，

其中“TAA”表示肿瘤相关的抗原结合区，

其中“HG”表示和任选的铰链结构域，

其中“TM”表示跨膜结构域,

其中“CSR”表示所述共刺激信号传导区域，

其中“ISD”表示细胞内信号传导结构域，和

其中“–”表示二价接头。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的多肽，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD3zeta(CD3δ)信号传导结构域。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的多肽，其中CD28的细胞质结构域的突变形式减少CAR-T细胞的衰竭。

8.分离的核酸序列，编码权利要求1至7中任一项所述的重组多肽。

9.包含权利要求8所述的分离的核酸序列的载体。

10.包含权利要求9所述的载体的细胞。

11.根据权利要求10所述的细胞，其中所述细胞选自αβT细胞、γδT细胞、自然杀伤(NK)细胞、自然杀伤T(NKT)细胞、B细胞、先天淋巴样细胞(ILC)、细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞、调节性T细胞、或其任意组合。

12.根据权利要求11所述的细胞，其中当CAR的抗原结合结构域与TAA结合时，所述细胞显示出抗肿瘤免疫力。

13.一种在患有TAA-表达性癌症的受试者中提供抗肿瘤免疫力的方法，该方法包括向所述受试者施用有效量的经遗传修饰以表达权利要求1至7中任一项所述的CAR多肽的免疫效应子细胞，从而在哺乳动物中提供抗肿瘤免疫力。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述免疫效应子细胞选自T细胞、自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和调节性T细胞。

15.根据权利要求13或14所述的方法，还包括向所述受试者施用检查点抑制剂。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述检查点抑制剂包括抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、抗CTLA-4抗体或其组合。