[发明专利]用于检测结直肠癌的试剂盒及其应用

权利要求书

1.用于检测结直肠癌的试剂盒，其特征在于，包括寡核苷酸预混液I组中核苷酸序列，所述核苷酸序列包括SEQ ID NO.01、SEQ ID NO.02、SEQ ID NO.03、SEQ ID NO.04、SEQ IDNO.05、SEQ ID NO.06、SEQ ID NO.07、SEQ ID NO.08、SEQ ID NO.09、SEQ ID NO.10。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括寡核苷酸预混液II组中核苷酸序列，所述核苷酸序列包括SEQ ID NO.08、SEQ ID NO.09、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11、SEQID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括游离DNA甲基化溶剂。

4.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括PCR检测预混液、PCR检测核苷酸预混液、质控品试剂；所述PCR检测核苷酸预混液包括PCR检测核苷酸预混液I和PCR检测核苷酸预混液II；所述PCR检测核苷酸预混液I包括所述第一组核苷酸序列，所述PCR检测核苷酸预混液II包括所述第二组核苷酸序列。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述核苷酸序列SEQ ID NO.04的3’端带有间壁3修饰，或磷酸化修饰；所述核苷酸序列SEQ ID NO.04的第16、23、25、32位腺嘌呤核苷酸带有锁核酸修饰。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述核苷酸序列SEQ ID NO.17的3’端带有间壁3修饰，或磷酸化修饰；所述核苷酸序列SEQ ID NO.15的第4、8、11、21位腺嘌呤核苷酸带有锁核酸修饰。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述游离DNA甲基化溶剂包括亚硫酸氢盐修饰试剂、DNA保护液、脱磺液、漂洗液、洗脱液、和/或氧化硅磁珠悬浮液。

8.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR检测预混液包括聚合酶缓冲液、Taq聚合酶、二价阳离子、和/或dNTPs。

9.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包括阳性质控品、阴性质控品、和/或空白质控品。

10.根据权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性质控品包括人工模拟血浆、和/或HCT116细胞系DNA；所述阴性质控品包括人工血浆、和/或HCT116细胞系DNA；所述空白质控品包括人工模拟血浆。

11.一种根据权利要求1-10任一项所述的试剂盒在结直肠癌诊断、结直肠实时监测或术后复发诊断中的应用。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，采用Q-PCR检测法进行检测，所述Q-PCR检测方式为三重PCR检测的组合方式。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述三重PCR检测的组合方式包括：检测管I为SEPTIN9、BCAT1、和ACTB；和/或检测管II为IKZF1、SDC2、ACTB。

14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，采用PCR检测的荧光信号为三个通道，所述三个通道采集的荧光信号分别为513nm-523nm、543nm-553nm、和662nm-672nm。