[发明专利]一种检测人运动神经元存活基因拷贝数的相对定量试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测人运动神经元存活基因拷贝数的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含: 用于在检测样本内测量SMN1基因第7外显子、SMN1基因第8外显子、SMN2基因第7外显子、SMN2基因第8外显子及SMN基因第6外显子的表达水平的试剂。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂包含:

第一反应液，包含：

SMN1基因第7外显子特异性上游引物Ex7-1F，序列如SEQ ID No.4所示；SMN基因第7外显子公用下游引物Ex7-R与探针Ex7-D，序列如SEQ ID No.5-6所示；SMN2基因第7外显子封闭引物Ex7-2B，序列如SEQ ID No.7所示； SMN1基因第8外显子特异性上游引物Ex8-1F，序列如SEQ ID No.8所示；SMN基因第8外显子公用下游引物Ex8-R与探针Ex8-D，序列如SEQ IDNo.9-10所示；SMN2基因第8外显子封闭引物Ex8-2B，序列如SEQ ID No.11所示；内参照CFTR上游引物P1、下游引物P2及探针P3，序列如SEQ ID No.1-3所示；及

第二反应液，包含：

SMN2基因第7外显子特异性上游引物Ex7-2F，序列如SEQ ID No.12所示；SMN基因第7外显子公用下游引物Ex7-R与探针Ex7-D，序列如SEQ ID No.5-6所示；SMN1基因第7外显子封闭引物Ex7-1B，序列如SEQ ID No.13所示；SMN2基因第8外显子特异性上游Ex8-2F引物，序列如SEQ ID No.14所示；SMN基因第8外显子公用下游引物Ex8-R与探针Ex8-D，序列如SEQID No.9-10所示；SMN1基因第8外显子封闭引物Ex8-1B，序列如SEQ ID No.15所示；内参照CFTR上游引物P1、下游引物P2及探针P3，序列如SEQ ID No.1-3所示；及

第三反应液，包含：

SMN基因第6外显子保留区域之上游引物Ex6-F，序列如SEQ ID No.16所示；下游引物Ex6-R及探针Ex6-D，序列如SEQ ID No.17-18所示；内参照CFTR上游引物P1、下游引物P2及探针P3，序列如SEQ ID No.1-3所示。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：第一反应液包含以下：50~100mM KCl、10~20mM Tris-HCl、1.0~2.0mM MgCl₂、100~300nmol/L dATP、100~300nmol/L dCTP、100~300nmol/L dGTP、300~600nmol/L dUTP，SMN1基因第7外显子特异性上游引物Ex7-1F100~300nmol/L，第7外显子公用下游引物Ex7-R100~300nmol/L，第7外显子公用探针Ex7-D150~250nM，SMN2基因第7外显子封闭引物Ex7-2B200~400nmol/L，SMN1基因第8外显子特异性上游引物Ex8-1F为500~700nmol/L，第8外显子公用下游引物Ex8-R500~700nmol/L，第8外显子公用探针Ex8-D 200~300nM，SMN2基因第8外显子封闭引物Ex8-2B 300~600nmol/L，内参照CFTR上游引物P1100~300nmol/L，内参照CFTR下游引物P2100~300nmol/L，内参照CFTR探针P3 100~200nM。