[发明专利]与植物脂肪酸代谢相关的基因PfDGAT2、表达载体、构建方法及应用有效
| 申请号： | 201811195464.7 | 申请日： | 2018-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN109266627B | 公开（公告）日： | 2021-09-17 |
| 发明（设计）人： | 王计平;周雅莉;任文燕;李润植;安茜;段露露;郝月茹 | 申请（专利权）人： | 山西农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/81;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/50 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 李振瑞 |
| 地址： | 030801 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 植物 脂肪酸 代谢 相关 基因 pfdgat2 表达 载体 构建 方法 应用 | ||
1.一种基因PfDGAT2在特异性选择α-亚麻酸分子中的应用，其特征在于，所述基因PfDGAT2的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，该基因与植物脂肪酸代谢相关。
2.根据权利要求1所述的基因PfDGAT2在特异性选择α-亚麻酸分子中的应用，其特征在于，所述基因PfDGAT2用于制备酵母表达载体。
3.根据权利要求2所述的基因PfDGAT2在特异性选择α-亚麻酸分子中的应用，其特征在于，所述的酵母表达载体按照以下步骤构建：
S1，目的基因扩增与纯化：以连接了目的基因PfDGAT2的pMD18-T载体为模板，以SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6为引物对，进行PCR扩增，然后凝胶回收并纯化目的基因，得到目的基因PfDGAT2片段，备用；
S2，分别将目的基因PfDGAT2和表达载体pYES2.0双酶切，然后将双酶切产物连接，得到含有基因PfDGAT2的酵母表达载体。
4.根据权利要求3所述的基因PfDGAT2在特异性选择α-亚麻酸分子中的应用，其特征在于，S1中，目的基因PfDGAT2的双酶切反应体系50μL如下：目的基因PfDGAT2片段20μL、10U/μL的Kpn I 1μL、10U/μL的BamH I 1μL、FD Buffer 5μL、ddH2O补足至50μL；
表达载体pYES2.0双酶切反应体系50μL如下：表达载体pYES2.0质粒1.5μg、10U/μL的Kpn I 1μL、10U/μL的BamH I 1μL、FD Buffer 10μL、ddH2O补足至50μL。
5.根据权利要求2所述的基因PfDGAT2在特异性选择α-亚麻酸分子中的应用，其特征在于，所述酵母表达载体用于构建酵母表达系统。
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