[发明专利]一种酶解肽及用于制备抗前列腺癌药物的用途有效
申请号: | 201811047197.9 | 申请日: | 2018-09-09 |
公开(公告)号: | CN108977491B | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | 焦立英;吕石翠;王兆丽 | 申请(专利权)人: | 南通市巨久新材料科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/30;C07K1/34;A61K38/01;A61P35/00 |
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地址: | 226199 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酶解肽 用于 制备 前列腺癌 药物 用途 | ||
1.一种酶解肽用于制备抗前列腺癌药物的用途,该酶解肽通过如下步骤制成:
S1、檀香种子蛋白的提取
将去皮的檀香种子粉碎,称取适量粉末,加入双蒸水,用NaOH溶液调节pH 8.5,置于40℃水浴中搅拌4h,用纱布过滤,滤去不溶杂质得到澄清溶液;用HCl溶液调整pH值至等点电处,室温静置,离心,弃上清得到乳白色蛋白质沉淀,用蒸馏水轻轻漂洗沉淀,备用;
S2、檀香种子蛋白的酶解
将乳白色蛋白质沉淀置于蒸馏水中悬浮直至溶解,加入Protamex复合蛋白酶进行酶解,Protamex复合蛋白酶的添加量为450U/g底物,酶解条件为:pH值,7.0;酶解温度,45℃;酶解时间,6小时;酶解结束后,加热使复合蛋白酶灭活,冷却至常温;冷却后,离心,取上清,冷冻干燥得冻干粉;
S3、酶解肽的分离纯化
将冻干粉用蒸馏水溶解,然后依次用截留分子量为3000u、1000u的超滤膜对所得到的酶解肽进行分离,将超滤所得1000u~3000u组分冷冻干燥即得;
其中:步骤S1中,粉碎成50~60目粉末,每40g粉末加入600ml双蒸水,等电点为4.2,离心条件为4000r/min×15min;步骤S2中,按照0.05mg/mL的浓度将乳白色蛋白质沉淀置于蒸馏水中悬浮直至溶解,在85℃条件下水浴10分钟使蛋白酶灭活,离心条件为9000r/min×25min;步骤S3中1g冻干粉加25mL蒸馏水。
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