[发明专利]一种低成本制备高纯度利那洛肽的方法

说明书

本发明公开了一种低成本制备高纯度利那洛肽的方法，本发明的技术方案包括以下步骤：1)使用CTC resin或Wang resin等树脂载体采用Fmoc法合成得到线性利那洛肽，或采用片段法或液相合成方法得到线性利那洛肽；2)采用一步氧化法得到正确配对的利那洛肽粗品；3)采用高效液相色谱纯化得到高纯度利那洛肽成品。本发明所述方法从氧化体系等方面着手，改进了利那洛肽二硫键正确配对的方法，其工艺简单、稳定且成本低，一步环化即可得到利那洛肽粗品，且能够保证纯化后的产品纯度大于99％，单杂可控制在0.1％以下。与现有技术相比，有更好的经济效益和应用前景。

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种低成本制备高纯度利那洛肽的方法。

背景技术

利那洛肽(linaclotide)为ironwood开发的新产品，是迄今为止首个鸟苷酸环化酶激动剂(GCCA)类药物。2012年8月美国FDA批准了利那洛肽用于治疗成人慢性特发性便秘和便秘型肠易激综合症(IBS-C)。利那洛肽在血浆中的浓度基本无法测出，但与肠道GC-C结合后，能导致细胞内和细胞外环鸟苷酸(cGMP)浓度升高。细胞内cGMP升高可以刺激肠液分泌，加快胃肠道移行，从而增加排便频率。该药物为胶囊制剂，每日口服一次。该化合物由14个氨基酸组成，包括3对二硫键连接的6个半胱氨酸残基。

利那洛肽结构序列如下：

H-Cys¹-Cys²-Glu³-Tyr⁴-Cys⁵-Cys⁶-Asn⁷-Pro⁸-Ala⁹-Cys¹⁰-Thr¹¹-Gly¹²-Cys¹³-Tyr¹⁴-OH(3对二硫键为：1-6、2-10、5-13)。

中国专利CN104974229A公开了一种合成利那洛肽的方法，其以ACM、Trt、tBu分别保护3对Cys进行合成，后期采用三步法氧化得到利那洛肽成品。此方法采用特殊原料进行生产，成本高，另外采用分步氧化，工艺复杂且各种高污染试剂用量大，不适合于放大生产。

中国专利CN105017387A公开了一种合成利那洛肽的方法，其首先合成6肽片段，环化得到含一对二硫键的片段；再与另一片段肽树脂缩合得到含一对二硫键的利那洛肽肽树脂，经裂解得到含有一对二硫键的利那洛肽粗肽，经分步氧化得到环化后的利那洛肽粗品。经纯化获得利那洛肽。该方法采用片段缩合，分步氧化，由于二硫键的交换作用，其定向氧化过程中仍会形成二硫键错配的产物。分步氧化，不仅操作复杂，成本高，同时收率低，并不适合方大生产。

中国专利CN103626849A公开了一种利那洛肽的制备方法，以Trt、ACM、Hqm分别保护3对Cys进行合成，切割后在统一体系中分步进行氧化。由于多肽经过多个酸碱反应体系，多肽易降解。另外使用各种特殊保护基德氨基酸并大量使用碘、水合肼、醋酸，增加了生产成本。明显降低了其工艺的经济效益。

然而上述专利均采用特殊原料进行合成，并采用分步氧化方法进行氧化得到利那洛肽，不仅工艺复杂、成本高，而且放大生产不易。如何在现有技术基础上简化工艺，提高总收率，同时避免使用特殊原料，降低生产成本，开发出便于放大生产的工艺，是现有技术研究的难题。

发明内容

针对现有问题，本发明的目的在于提供一种低成本制备高纯度利那洛肽的方法，使得本发明所述方法能够显著简化生产工艺，提高利那洛肽的总收率，适合于放大生产。同时大大降低了生产成本，具有很好的经济效益和应用前。

为此，本发明采用以下技术方案：一种低成本制备高纯度利那洛肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：