[发明专利]一种视神经萎缩动物模型的构建方法、试剂盒和应用有效
| 申请号： | 201810938043.2 | 申请日： | 2018-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN109022485B | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 田颖;李大力;刘明耀;邵艳姣;尹树明;席在喜 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学;上海邦耀生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 宋南 |
| 地址： | 200333 上海市普*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 视神经 萎缩 动物 模型 构建 方法 试剂盒 应用 | ||
1.一种视神经萎缩动物模型的构建方法，其特征在于，其包括：将用于使动物OPA3基因2号外显子第277位点G突变为A的组合物注射到动物受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕雌性动物体内，产出的动物作为F0代动物；
所述组合物含有如下成分：
Cas9mRNA，sgRNA和ssODN；
所述动物为小鼠，所述sgRNA的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，所述ssODN的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，所述Cas9mRNA的碱基序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的视神经萎缩动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括：将经鉴定正确的体细胞OPA3基因的2号外显子第277位点G突变为A的F0代动物与野生型异性动物交配以获得F1代杂合子动物。
3.根据权利要求2所述的视神经萎缩动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括：
将经鉴定正确的体细胞OPA3基因的2号外显子第277位点G突变为A的F1代杂合子动物自交，得到F2代动物，即为视神经萎缩动物模型。
4.一种用于构建视神经萎缩动物模型的试剂盒，其特征在于，其包括用于使动物OPA3基因2号外显子第277位点G突变为A的组合物；所述组合物含有如下成分：Cas9mRNA，sgRNA和ssODN；
所述sgRNA的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，所述ssODN的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，所述Cas9mRNA的碱基序列如SEQ ID NO.3所示。
5.由权利要求1-3任一项所述的构建方法所得到的神经萎缩动物模型在眼科疾病研究中的应用。
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