[发明专利]过表达Dkk-3诱导的肌肉萎缩模型及其应用有效

专利信息
申请号: 201510215820.7 申请日: 2015-04-29
公开(公告)号: CN106190958B 公开(公告)日: 2019-11-15
发明(设计)人: 胡苹;尹杰 申请(专利权)人: 中国科学院上海生命科学研究院
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077;C12Q1/02;A01K67/027;A61K49/00
代理公司: 31219 上海光华专利事务所(普通合伙) 代理人: 郭婧婧;许亦琳<国际申请>=<国际公布>
地址: 200031*** 国省代码: 上海;31
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明提供了一种Dkk‑3的新用途,并将Dkk‑3用于诱导肌肉细胞发送萎缩,成功构建了肌肉萎缩细胞模型和肌肉萎缩动物模型。本发明的肌肉萎缩细胞模型和动物模型具有肌肉萎缩的典型特征,可极好地模拟体内肌肉萎缩的发生发展,是肌肉萎缩基础和临床应用研究的理想细胞模型和动物模型,可良好地应用于筛选治疗肌肉萎缩的药物。
搜索关键词: 表达 dkk 诱导 肌肉 萎缩 模型 及其 应用
【主权项】:
1.Dkk-3在构建肌肉萎缩细胞模型或肌肉萎缩动物模型中的用途,当构建肌肉萎缩细胞模型时,包括如下步骤:在终末分化的肌肉细胞中过表达有效剂量的Dkk-3;获得肌肉萎缩细胞模型,所述过表达有效剂量的Dkk-3的方法为:采用新鲜的含Dkk-3腺病毒的分化培养基,培养终末分化的肌肉细胞;所述Dkk-3腺病毒能够过表达有效剂量的Dkk-3;当构建肌肉萎缩动物模型时,包括以下步骤:给哺乳动物通过胫骨前肌局部注射的方式过表达有效剂量的Dkk-3;获得肌肉萎缩动物模型。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院上海生命科学研究院,未经中国科学院上海生命科学研究院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201510215820.7/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种促进创伤再生修复的细胞因子制剂的制备方法-201911106753.X
  • 张鹏成 - 安徽科门生物科技有限公司
  • 2019-11-13 - 2020-02-11 - C12N5/077
  • 本发明公开一种促进创伤再生修复的细胞因子制剂的制备方法,包括以下步骤:S1、肌腱干细胞培养液的制备;S2、肌腱干细胞的制备;S3、初代肌腱干细胞获得;S4、肌腱干细胞培养;S5、肌腱干细胞获得。通过肌腱干细胞的制备采用的直接剪切方式获得,然后置于消化液中消化获得单细胞避免过多的单细胞聚集,获得的单细胞单独培养以便减少多细胞聚集造成其他局部组分吸收不充分,这种细胞在培养时吸收营养不充分极易导致分化现象,影响细胞的增殖速率,离心后获得的富血小板血浆中含有大量的生长因子,可直接被应用。
  • 从成纤维细胞生成离体软骨-201911186070.X
  • P·欧希隆 - 脊核细胞有限责任公司
  • 2013-08-08 - 2020-02-07 - C12N5/077
  • 本发明的实施方案包括从软骨细胞离体产生软骨,所述软骨细胞从成纤维细胞或干细胞分化。在特定的实施方案中,使成纤维细胞经历条件以产生软骨组织形式的软骨细胞,例如具有所需形状的软骨。在至少一些实施方案中,是从有需要的个体的身体区域的成像,产生用于软骨的所需形状的塑模,和在特定条件下将成纤维细胞接种在塑模中。
  • 一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法-201911226803.8
  • 戴巍;刘学忠;顾建红 - 扬州大学
  • 2019-12-04 - 2020-02-07 - C12N5/077
  • 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法。所述鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法包括以下步骤:采用SPF鸡,取其肌肉组织,加入含有I型胶原酶与胰酶比例为1-2:1的混合酶溶液,37℃下消化,再经两次30min的差速贴壁纯化后,得到目的细胞。该方法有效解决了现有技术中细胞活率低、分离数量少、可保存性差的缺陷和不足。
  • 一种猪前体脂肪细胞的分离培养方法-201610402660.1
  • 张国华;卢建雄;陈妍;臧洪伟 - 西北民族大学
  • 2016-06-08 - 2020-02-07 - C12N5/077
  • 本发明涉及细胞工程和组织领域,具体而言,涉及一种猪前体脂肪细胞的分离培养方法。本发明通过对现有的分离培养方法进行了改进,在Ⅰ型胶原酶消化后,采用冷消化技术处理细胞,通过加入研磨珠的方式充分分离前体脂肪细胞,并且取消了尼龙筛过滤、离心和红细胞裂解的操作,从而取得了提高实验的时间进行自由度、前体脂肪细胞分离程度更彻底以及简化操作流程、减小污染几率、降低对前体脂肪细胞的损伤等技术效果。
  • 产生软骨细胞谱系细胞和/或类软骨组织的方法和组合物-201480028250.4
  • 戈登·凯勒;阿普里尔·M·克拉夫特 - 大学健康网络
  • 2014-04-02 - 2020-02-07 - C12N5/077
  • 一种产生软骨细胞和/或软骨,任选地类关节的非肥大软骨细胞和/或类软骨的组织和/或类肥大软骨细胞的细胞和/或类软骨的组织的方法,所述方法包括:a.采用特化混合物的近轴中胚层培养类原条中胚层群,任选地CD56+,PDGFRα+KDR‑类原条中胚层群,所述混合物包含:i.FGF激动剂;ii.BMP抑制剂;任选地头蛋白,LDN‑193189,Dorsomorphin;和iii.任选地TGFβ抑制剂中的一种或多种,任选地SB431524;和Wnt抑制剂,任选地DKK1,rWP2,或XAV939;以特化表达细胞表面CD73,CD105和/或PDGFR‑β的近轴中胚层群;b.产生软骨细胞前体群,包括:i.将表达CD73,CD105和/或PDGFR‑β的所述近轴中胚层群按照高细胞密度任选地培养于无血清或含血清培养基中;ii.采用TGFβ3激动剂将所述高细胞密度CD73+,CD105+和/或PDGFRβ+近轴中胚层群培养于无血清培养基中以产生高细胞密度Sox9+,胶原蛋白2+软骨细胞前体群;和c.或者i.采用所述TGFβ3激动剂培养所述高细胞密度Sox9+,胶原蛋白2+软骨细胞前体群一段延长的时间以产生类关节的非肥大软骨细胞和/或类软骨的组织;或ii.采用BMP4激动剂培养所述高细胞密度Sox9+胶原蛋白2+软骨细胞前体群一段延长的时间以产生类肥大软骨细胞的细胞和/或类软骨的组织。
  • 小分子化合物4-氨基联苯在促干细胞增殖与成软骨分化中的应用-201910833349.6
  • 张帅;周海;周光前;李真;莫翠萍 - 深圳丹伦基因科技有限公司
  • 2019-09-04 - 2020-02-04 - C12N5/077
  • 本发明公开了小分子化合物4‑氨基联苯(4‑Aminodiphenyl,4‑ABP)在促进间充质干细胞增殖及成软骨分化能力方面的应用。实验表明,4‑ABP能够促进间充质干细胞(包括骨髓、脂肪、脐带、胎盘、关节组织及关节液,以及诱导多能干细胞等组织细胞来源的间充质干细胞)的增殖和成软骨方向的分化,可以提高干细胞的Collagen Ⅱ、Aggrecan、Lubricin的基因表达水平以及相应蛋白的表达含量。因此本发明证明了4‑ABP对间充质干细胞的增殖和成软骨分化的促进作用,4‑ABP有望成为干细胞介导的软骨损伤与疾病的再生修复刺激制剂或辅助制剂。本发明提供的4‑ABP作为小分子制剂可在软骨再生及组织工程相关的MSC制备和移植前期诱导分化等方面的应用,为发展关节软骨组织损伤和疾病的防治相关的新型技术方案和技术措施奠定基础。
  • 一种人间充质干细胞成骨诱导分化培养基及制备方法-201710791078.3
  • 罗乐;朱灏 - 安徽瑞杰赛尔生物科技有限公司
  • 2017-09-05 - 2020-01-17 - C12N5/077
  • 本发明涉及干细胞技术领域,具体涉及一种人间充质干细胞成骨诱导分化培养基及制备方法,所述人间充质干细胞成骨诱导分化培养基包括α‑MEM/HG‑DMEM培养基,还包括如下组分及其浓度:胎牛血清5‑50%体积百分比,抗坏血酸10‑100μM,磷酸甘油5‑50mM,地塞米松50‑500nM,胰岛素生长因子‑10.1‑10nM和胰岛素生长因子‑20.5‑50nM;本发明通过胰岛素生长因子‑1和胰岛素生长因子‑2增强间充质干细胞成骨分化信号活化,促进成骨细胞增殖,从而提高人间充质干细胞成骨分化效率及特异性,缩短分化时间,提高诱导效率,同时制备方法简便,使用方便,可实现稳定、高效的人间充质干细胞成骨诱导分化。
  • FH535诱导的肌肉萎缩模型及其应用-201510214554.6
  • 胡苹;尹杰 - 中国科学院上海生命科学研究院
  • 2015-04-29 - 2020-01-07 - C12N5/077
  • 本发明提供了一种FH535的新用途,并将FH535用于诱导肌肉发生萎缩,成功构建了肌肉萎缩细胞模型和肌肉萎缩动物模型。本发明的肌肉萎缩细胞模型和动物模型具有肌肉萎缩的典型特征,可极好地模拟体内肌肉萎缩的发生发展,是肌肉萎缩基础和临床应用研究的理想细胞模型和动物模型,可良好地应用于筛选治疗肌肉萎缩的药物。
  • 多能干细胞快速分化为骨骼肌细胞的方法及骨骼肌细胞-201910669117.1
  • 张文胜;李鹏;吴倩鑫 - 张文胜
  • 2019-07-23 - 2019-12-13 - C12N5/077
  • 本发明涉及干细胞领域,具体涉及一种多能干细胞快速分化为骨骼肌细胞的方法,旨在解决多能干细胞诱导骨骼肌细胞时间长,效率低的问题。具体包括向培养基中的多能干细胞中引入含有至少一种潜能基因的表达载体,从而将所述多能干细胞定向分化为骨骼肌细胞。通过在诱导人的多能干细胞向骨骼肌细胞定向分化的不同阶段,特异诱导Mef2b、Pax3、Pax7、Mydo1、Pitx1、Myogenin、Mef2c、Mrf4、Desmin中的一种或几种不同组合基因的表达,可获得了纯度高达80%的功能性的骨骼肌细胞,而且显著缩短了诱导的周期。
  • 成纤维细胞微球的制备方法及其应用-201910869367.X
  • 米楠;穆小生 - 米楠;南京佰尔生物科技有限公司;穆小生
  • 2019-09-16 - 2019-12-03 - C12N5/077
  • 本发明公开了一种成纤维细胞微球的制备方法及其应用,该成纤维细胞微球的制备方法包括以下步骤:步骤1,在无菌环境下取人耳后皮肤组织;步骤2,用组织贴壁方法将步骤1中的人耳后皮肤组织制备出成纤维细胞;步骤3,将所述成纤维细胞制备成单一细胞悬液;以及步骤4,使所述单一细胞悬液倒置悬浮,形成成纤维细胞微球;该成纤维细胞微球的制备过程简易快捷、耗时短、投资小,可以转化为机械化批量生产。
  • 一种猪骨骼肌卫星细胞的培养基PM+及其应用-201610602491.6
  • 曹建华;王昇;任瑞敏;黄英;赵书红 - 华中农业大学
  • 2016-07-27 - 2019-11-29 - C12N5/077
  • 本发明属于动物细胞培养技术领域,具体涉及一种猪骨骼肌卫星细胞的培养PM+及其应用。所述的猪骨骼肌卫星细胞培养的培养基PM+,按重量/体积计的成分如下所述:培养基PM+总体积为1L,添加胎牛血清(FBS)20%;细胞培养添加剂(GlutaMax)1%;非必需氨基酸(NEAA)1%;抗生素‑抗真菌剂(AA)1%;鸡胚培养物0.5%;庆大霉素50mg/L;碱性成纤维细胞生长因子终浓度为25μL/L,用RPMI 1640液体基础培养基补足至培养基PM+总体积的全量。本发明还公开了该培养基的应用。
  • 一种快速建立H9c2心肌细胞脂肪化模型的方法-201910788734.3
  • 李广平;张帆 - 首都医科大学附属北京世纪坛医院
  • 2019-08-26 - 2019-11-26 - C12N5/077
  • 本发明提出了一种快速建立H9c2心肌细胞脂肪化模型的方法,步骤如下:将复苏冻存的H9c2细胞采用DMEM高糖完全培养基,连续培养至3代;心肌细胞胰酶消化,DMEM高糖完全培养基终止消化,收集细胞悬液,离心,弃上层,加入DMEM高糖完全培养基,重新得到细胞悬液;细胞计数;细胞种板;配制脂性培养基,并将其加入到细胞种板中,培养24~48小时后,得到H9c2心肌细胞脂肪化模型。本发明的有益效果如下:操作容易,成脂效果好,成本较低,成模速度快,能够为今后深入研究动脉粥样硬化所引发的心血管疾病提供理论参考。
  • 一种血小板裂解液及其制备方法和应用-201910836895.5
  • 刘广亚;许育兵;单桂秋 - 中国人民解放军南部战区总医院
  • 2019-09-05 - 2019-11-22 - C12N5/077
  • 本发明提供一种血小板裂解液及其制备方法和应用,其中,本发明的制备方法包括如下步骤:S1、制备所需浓度血小板的富血小板血浆;S2、将富血小板血浆放置‑20℃冰箱冰冻保存24h,取出至于37℃水浴箱中解冻5min;重复以上冻融过程;S3、将最后一次解冻的富血小板血浆离心,取上清液,即为所需血小板裂解液。本发明在‑20℃常规冰箱条件下制备血小板裂解液,无需超低温冰箱及液氮设备,实现在没有特殊设备情况下制备血小板裂解液。无需添加任何外源性物质,安全性较高。可以制备出比目前常规方法相同或更优的血小板裂解液。
  • 一种牙周膜细胞微球的制备方法-201910698665.7
  • 闫香珍 - 同济大学
  • 2019-07-31 - 2019-11-19 - C12N5/077
  • 本发明涉及一种牙周膜细胞微球的制备方法,将牙周膜细胞接种于包被壳聚糖涂膜的培养板上培养成牙周膜细胞微球体。将壳聚糖的酸溶液接种于培养板上,将培养板烘干后,培养板的孔中加入碱溶液进行中和,蒸馏水冲洗干净后,将培养板浸泡于乙醇中,PBS冲洗,最后紫外灯照射,得到包被壳聚糖涂膜的培养板。与现有技术相比,本发明将牙周膜细胞培养在壳聚糖膜上形成微球体,成球方法简单,容易制作且具有很好的重复性,与传统的二维培养方法相比,牙周膜细胞微球培养能够维持牙周膜细胞的干性。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top