[发明专利]一种评估CART细胞体内代谢的方法在审
申请号: | 201810889028.3 | 申请日: | 2018-08-07 |
公开(公告)号: | CN110819679A | 公开(公告)日: | 2020-02-21 |
发明(设计)人: | 刘雅容;史子啸 | 申请(专利权)人: | 上海恒润达生生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;A61K49/00 |
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地址: | 201210 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 评估 cart 细胞 体内 代谢 方法 | ||
1.一种评估CD19-CART细胞体内代谢方法包括体内实验评估方法。
2.权利要求1所述体内实验评估包括抗人CD19CART细胞液注射荷瘤鼠给药模型、抗人CD19CART细胞液注射非荷瘤鼠给药模型。
3.权利要求1所述体内实验评估包括抗鼠CD19CART细胞液注射荷瘤鼠模型。
4.权利要求2所述的鼠为NOG小鼠。
5.权利要求2所述抗人CD19CART细胞液注射荷瘤鼠给药模型具体造模方法为小鼠尾静脉注射Raji淋巴瘤细胞建立疾病模型,24小时后尾静脉注射CAR阳性T细胞或相同细胞总数的对照细胞,分别于CAR-T/NT细胞注射后固定时间点采集小鼠外周血,流式细胞计数法检测T细胞百分比、CAR+细胞比例及CD19+肿瘤细胞比例,研究CAR-T细胞在NOG小鼠血液中的增殖、存续及与肿瘤生长的相关性。
6.权利要求2所述抗人CD19CART细胞液注射非荷瘤鼠给药模型具体造模方法为每只小鼠尾静脉注射CAR阳性T细胞。注射CAR-T细胞后于固定时间点进行解剖。解剖取血液、骨髓、脾脏组织利用流式细胞仪检测其中T细胞含量和CAR的表达。
7.权利要求3所述抗鼠CD19CART细胞液注射荷瘤鼠模型具体造模方法为小鼠皮下注射A20肿瘤细胞建立疾病模型,待肿瘤体积达到100mm3左右时,模拟临床预处理方式采用环磷酰胺注射液腹腔注射对小鼠进行预处理。24h后尾静脉注射鼠源CAR-T细胞。观察期为给药后60天,评估内容包括:定期测量小鼠肿瘤大小;取各组织样品,流式检测T细胞比例和肿瘤细胞负荷。
8.权利要求3所述的抗鼠CD19CART细胞注射液给药模型,注射的是免疫正常Balb/c小鼠。
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