[发明专利]一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法

权利要求书

1.一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)取以下重量份的成分，分别粉碎后混合，得到浆料基质：菠萝7份、柿子5份、番薯1份、西红柿3份、莴苣3份、火龙果1份、油麦菜1份、黄瓜3份、西番莲0.5份、金银花0.5份、葡萄籽0.5份、樱桃0.5份，水20份；

2)向浆料基质中加入130U/g的单宁酶、720U/g的纳豆激酶、290U/g的果胶酶、210U/g的甘露聚糖酶、640U/g的植酸酶、220U/g的纤维素酶，调节pH为8.2，以初始温度为30℃，3℃/min的升温速度升温至66℃，保持47min，而后以10℃/min的升温速度升温至86℃，保持1min，再以2.5℃/min的降温速度降温至36℃，并用CH₃COOH调整其pH至6.1，继续保持128min；而后向其中加入350U/g的柚苷酶、420U/g的普鲁兰酶、120U/g的半乳糖苷酶，调节pH为7.3，酶解温度32℃，在氮气保护状态下酶解150min；

3)取蛋白核小球藻于1/3浓度的Zarrouk培养基中活化3d，而后接种至SE培养基中，以温度25℃，每天光照20h、黑暗4h，光照强度4000lux的条件培养，每8d传代一次，直至培养液中藻细胞浓度为5×10⁷CFU/mL，即得到蛋白核小球藻培养液；取20重量份蛋白核小球藻培养液，离心收集藻细胞，将其接种至新鲜的BG11培养基中，调整其中蛋白核小球藻浓度至10⁶CFU/mL，再向其中接入发菜念珠藻至其中发菜念珠藻浓度为5×10⁵CFU/mL，以温度24℃，0.01～1m3/h的通气速率，光强8000lux，保持24h全光照持续培养4d，而后以3000rpm的转速离心，弃去上清，收集得到混合菌体；

4)对步骤3)所制备的蛋白核小球藻培养液，另取20重量份，离心收集藻细胞，将其分散于无菌水中，至其中蛋白核小球藻浓度为10⁷CFU/mL，而后利用超声破碎仪以300w的功率超声处理5s间隔7s，重复30次，将破碎后的产物与步骤2)所得的酶解产物混合均匀，得到发酵培养基；以每100g发酵培养基对应3g菌粉的比例向发酵培养基中接入短双歧杆菌菌粉，以32℃的温度培养18h，而后以短双歧杆菌接入质量的2倍向其中接入拉曼乳杆菌菌粉，调整温度至27℃，继续培养6h；而后，向其中接入步骤3)所得的混合菌体，所述混合菌体接入的湿重为短双歧杆菌菌粉接入质量的10倍；而后以1000lux的光照，24℃的温度，保持以0.4vvm的速率持续通入氧气，培养16h；而后以1500rpm的转速离心，取上清，在64℃条件下保持10min，而后升温至72℃保持1min，而后降温至66℃保持4min，将所得产物利用均质机以120MPa的压力进行细胞破壁，即得到果蔬酵素溶液；

5)取柠檬果实匀浆，果葡糖浆，白砂糖，蜂蜜，所述果蔬酵素溶液进行混合调配，保证混合物中柠檬果实匀浆的质量分数为39％，蜂蜜的质量分数为7％，果蔬酵素溶液的质量分数为25％，即得到所述果蔬酵素蜂蜜柠檬茶。

2.根据权利要求1所述的一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法，其特征在于所述果蔬酵素蜂蜜柠檬茶中还含有黄原胶，瓜尔胶，食用葡萄糖，低聚果糖，柠檬酸，DL-苹果酸，维生素C，三氯蔗糖，食品用香精。

3.根据权利要求2所述的一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法，其特征在于步骤5)中，在混合调配前先将白砂糖和蜂蜜混合，经一次过滤去除蜂尸和固体杂质，而后经二次过滤去除蜂蜡和固体杂质，再进行灭菌，而后再将该白砂糖和蜂蜜的混合物用于混合调配。

4.根据权利要求1所述的一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法，其特征在于步骤5)中，所述柠檬果实匀浆在混合调配前先进行腌渍。

5.根据权利要求1所述的一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法，其特征在于步骤2)所述的氮气保护是向酶解液所在容器中持续通入氮气。

6.根据权利要求1所述的一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法，其特征在于步骤3)对蛋白核小球藻的活化过程中，每天更换新鲜培养基，所述新鲜培养基均为1/3浓度的Zarrouk培养基。