[发明专利]一种HoxD10基因在胃癌中的应用

说明书

本发明公开了一种HoxD10基因在胃癌中的应用，本发明通过实验发现胃癌细胞中HoxD10的表达水平影响细胞的增值、迁移能力、凋亡等，对胃癌的发生起重要作用，且转录因子HoxD10在胃癌中甲基化的表达调控和启动子甲基化检测可应用于胃癌的诊断，此外，本实验通过软件预测、构建载体，在胃癌细胞中利用荧光素酶报告基因分析验证了IGFBP3是HoxD10的靶基因，并进一步确定了其活性结合位点，这为利用HoxD10为胃癌提供药物靶点方面提供了一定的应用价值。本发明可为胃癌的诊断和预后提供有力的技术支持。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及一种HoxD10基因在癌症中的应用，尤其涉及其在胃癌中的应用。

背景技术

胃癌是全球高发的恶性肿瘤之一，其死亡率占居我国肿瘤死因的第二位。近半数胃癌患者一经诊断就处于淋巴结或远处转移，远处转移患者的五年生存率不到5％。胃癌进展涉及多因素、多步骤的生物学过程，与癌基因的激活和抑癌基因的失活密切相关，对抑癌基因的深入研究能更好的揭示胃癌发生发展的机制。表观遗传学研究发现在基因的DNA序列没有发生改变的情况下，抑癌基因表达发生了可遗传的信息变化，导致基因失活，抑癌功能丧失。其中，DNA甲基化是最重要的基因表观修饰方式之一，也是抑癌基因失活的最重要机制之一。

HoxD10属于人类同源盒基因(Homeobox,Hox)家族一员，Hox基因分为A、B、C和D 4簇至少39个成员。Hox编码的同源蛋白是重要的转录因子，Hox蛋白同源结构域的氨基酸残臂有几个核心的共同结合元件，包括TTAT、TAAT和TTAC，结合后可以调节下游基因的转录翻译，进而调控胚胎细胞的增殖和分化，也是决定细胞表型的调节因素。近年来还发现Hox基因的表达影响多种实体肿瘤的侵袭、转移等生物学行为。

通过基因甲基化岛的筛选研究，发现HoxD10是受启动子甲基化调控的重要候选胃癌抑制基因。阐明HoxD10在胃癌发生发展中的调控功能和诊断价值将在人类胃癌诊断和基因靶向治疗方面发挥重要作用。因此，明确HoxD10在胃癌中的应用,具有广泛的科研和临床应用前景。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的上述缺陷，提供一种HoxD10基因作为IGFBP3靶基因的调控者在制备调节癌症细胞中IGFBP3表达水平药物或试剂盒中的用途，具体地，是HoxD10基因促进IGFBP3的表达，尤其是可在RNA和蛋白水平同时促进IGFBP3的表达，所述的癌症细胞主要为胃癌细胞。

所述的IGFBP3启动子区域和转录因子HoxD10结合的位点为HBSII、HBS3、HBS4和HBS5。

本发明还提供了一种IGFBP3作为癌症治疗靶点在制备治疗癌症药物或试剂盒中的用途。

本发明还提供了一种转录因子HoxD10在制备抑制胃癌细胞增殖或迁移、或促进胃癌细胞凋亡的药物或试剂盒中的用途。

本发明通过实验发现胃癌细胞中HoxD10的表达水平影响细胞的增值、迁移能力、凋亡等，对胃癌的发生起重要作用，且转录因子HoxD10在胃癌中甲基化的表达调控和启动子甲基化检测可应用于胃癌的诊断，此外，本实验通过软件预测、构建载体，在胃癌细胞中利用荧光素酶报告基因分析验证了IGFBP3是HoxD10的靶基因，并进一步确定了其活性结合位点，本发明为利用HoxD10为胃癌提供药物靶点方面提供了一定的应用价值。

附图说明

图1：胃癌与癌旁组织、胃肠化组织、慢性浅表性胃炎组织、胃癌细胞株AGS\MKN28\MKN45\

NCI-N87甲基化检测情况。T:胃癌组织；A:癌旁正常组织；IM:肠化伴有萎缩胃组织；N:慢性浅表性胃炎组织；M:甲基化；U:非甲基化；

图2是5-Aza-dC处理胃癌细胞株AGS\MKN28\MKN45\NCI-N87后，HoxD10表达情况的变化；