本发明公开了凋亡素组合肽及其在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明的一种凋亡素组合肽,其特征在于由以下元件组成:(1)凋亡素82‑88、111‑121位的两个核定位信号;(2)凋亡素33‑46位的疏水氨基酸富含区,该序列置于两个核定位信号之间;以及(3)转导肽,位于凋亡素核定位信号和疏水区序列组成的多肽的氨基端,用于静脉用药时诱导组合肽进入细胞质。优选的,所述的凋亡素组合肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。实验证明,该凋亡素组合肽相较于凋亡素具有更高的促肿瘤细胞凋亡的活性,并且分子量小,使用安全,同时能够降低合成生产的成本。