[发明专利]一种利用TaqMan探针定量检测对虾白斑综合症病毒的方法在审
申请号: | 201810437218.1 | 申请日: | 2018-05-09 |
公开(公告)号: | CN108342512A | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
发明(设计)人: | 刘红;李云;于晓丹;戴习林;朱其建;周微微 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
代理公司: | 南京业腾知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32321 | 代理人: | 李静 |
地址: | 201306 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 对虾白斑综合症病毒 基因组DNA 定量检测 荧光定量PCR检测 检测灵敏度 待测样品 疾病检测 设计引物 我国对虾 早期预警 假阳性 拷贝数 检测 引物 用时 应用 养殖 | ||
1.一种利用TaqMan探针定量检测对虾白斑综合症病毒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取待测样品的基因组DNA;
(2)设计引物和TaqMan探针:
上游引物序列:5'-CAA GGG AAC TGT CGC TTC-3'
下游引物序列:5'-CCA AGA TCG GCG ATA AGT-3'
TaqMan探针的序列为:5'-CAT GCC AGC CGT CTT CCA G-3';
(3)采用步骤(2)设计的引物和TaqMan探针对待测样品的基因组DNA进行荧光定量PCR检测。
2.如权利要求1所述的利用TaqMan探针定量检测对虾白斑综合症病毒的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述荧光定量PCR检测的反应体系为20μL,包括2×SuperReal colorPreMix 10μL,上游引物、下游引物各0.6μL,TaqMan探针0.4μL,ddH2O 7.4μL,提取的基因组DNA 1μL。
3.如权利要求1或2所述的利用TaqMan探针定量检测对虾白斑综合症病毒的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述荧光定量PCR检测的反应程序为:95℃预变性15min;95℃变性15s,61℃退火60s,采集荧光信号,40个循环。
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