[发明专利]一种适用于生物样本的SEM检测样品制备试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种适用于生物样本检测的SEM样品试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括有多孔板，多孔板的孔内设置有多聚赖氨酸修饰的硅片，及SEM检测的试剂。

2.根据权利要求1所述的一种适用于生物样本检测的SEM样品试剂盒，其特征在于：所述的多聚赖氨酸修饰的硅片通过以下步骤制备：

(1)切割出统一尺寸规格的硅片；

(2)将硅片进行清洗；

(3)对硅片进行亲水处理，分别在硫酸、氨水水溶液中水浴加热处理10min；

(4)将(3)所得硅片用氮气吹干；

(5)将干燥的硅片置于培养板中，并加入0.1-1％多聚赖氨酸，孵育；

(6)将(5)所得硅片用1X PBS缓冲液清洗，得到多聚赖氨酸修饰的硅片。

3.根据权利要求1所述的适用于生物样本检测的SEM样品试剂盒，其特征在于：所述的步骤(2)为分别在洗涤灵、甲醇、丙酮、去离子水中依次超声清洗15min。

4.一种基于权利要求1所述的SEM样品试剂盒的SEM检测方法，其特征在于包括有以下步骤：

1)将多聚赖氨酸修饰的硅片置于多孔板的一个孔中；

2)将待测生物样本溶液滴加在多孔板内的多聚赖氨酸修饰的硅片上，孵育；

3)除多余的生物样本溶液；

4)加入1X PBS缓冲液，并在1X PBS缓冲液中添加2wt％戊二醛、4wt％PFA多聚甲醛，4℃孵育30min-16h；

5)用1X PBS缓冲液清洗；

6)加入1％磷钨酸处理；

7)超纯水清洗；

8)再依次用30％、50％、70％、90％的乙醇处理5min；

9)100％乙醇处理5min，重复2次；

10)含50％体积比六甲基二硅氮烷的乙醇处理15-30s；

11)100％六甲基二硅氮烷处理15-30s；

12)去除六甲基二硅氮烷；

13)置于在真空干燥器中干燥；

14)然后将经上述步骤处理后的多聚赖氨酸修饰的硅片置于SEM上检测。

5.根据权利4所述的SEM检测方法，其特征在于：所述的待测生物样本为外泌体、细胞、细菌、病毒或生物组织。