[发明专利]一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法

说明书

本发明涉及一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法，属于中药化学领域，工艺步骤包括如下：弯管列当原料粉碎，加95％乙醇超声提取，提取液浓缩得到浸膏，再通过乙酸乙酯‑水双相分散萃取，取乙酸乙酯有机相浓缩，经中压硅胶柱层析进行分离纯化，得到高纯度crenatoside。本发明方法具有工艺简单、高效快速、纯度高、制备量大等优点。

技术领域：

本发明属于中药化学领域，涉及crenatoside的提取制备工艺，主要是一种应用中压柱层析法从弯管列当粗提物中制备高纯度crenatoside的方法。

背景技术：

Crenatoside，别名：Oraposide；Orobanchoside，化学名：β-D-glucopyranose,3-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-1,2-O-[(2S)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-1,2-ethanediyl]-,4-[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-propenoate]，分子式：C₂₉H₃₄O₁₅，分子量：622.57，成分分类：苯乙醇苷类，结构式如下：

物理性质：淡黄色晶体(甲醇)，UV₃₆₅下显蓝色荧光，1％三氯化铁乙醇溶液反应呈蓝黑色，具有良好的水溶性和吸湿性，易溶于甲醇，可溶于丙酮。药理性质：具有显著抗氧化活性，仅次于维生素C，同时药理实验表明其还具有降血脂、降血糖、抗炎、杀菌等作用。

目前没有制备高纯度crenatoside的系统方法的报道。因此有必要寻求一种简便、安全、经济、高效的提取、分离和纯化crenatoside的方法，从而促进对弯管列当的深度开发和利用。

发明内容：

本发明目的在于开发一种工艺简单，高效、快速，提纯制备高纯度crenatoside的方法。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法，包括以下步骤：

1)超声提取：将弯管列当药材粉碎，用乙醇作为提取溶媒进行超声提取，旋转蒸发浓缩得到浸膏；

2)萃取：将上述浸膏通过乙酸乙酯-水双相分散萃取，取乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯，剩余萃取浓缩物；

3)中压硅胶层析：将上述所得萃取浓缩物经中压硅胶柱层析进行分离纯化，根据TLC检识合并目标流份，得到crenatoside洗脱液；

4)重结晶：将上述组分减压浓缩后用溶剂溶解，敞口静置析出crenatoside结晶，过滤；重复本步骤2-4次，阴干，即得crenatoside。

优选地，所述步骤1)中粉碎为80-100目；超声时间每次为40-60min，超声提取3-5次后合并提取液。

优选地，所述步骤1)中乙醇用量为弯管列当粉体积的8-10倍，乙醇浓度为95％。

优选地，所述步骤2)中乙酸乙酯和水的体积比为1:1；乙酸乙酯与步骤1)中弯管列当粉体积比为2:1。

优选地，所述步骤3)中中压硅胶柱层析色谱溶剂系统为二氯甲烷:甲醇:水体积比为(18-12):1:0.1；恒梯度洗脱，按每份50mL收集，TLC检识(聚酰胺板，青岛海洋化工厂产品；展开剂，二氯甲烷：甲醇：水(10:3:0.1)；显色剂，1％三氯化铁乙醇溶液)，取比移值(Rf)＝0.4的单点流份合并，得到crenatoside洗脱液。

优选地，所述步骤3)分离纯化的洗脱流速为10-20mL/min，柱压为2.5MPa。

优选地，所述步骤4)结晶步骤溶剂为甲醇。