[发明专利]反应动力学定量探测仪及转动马达ATP合酶活性检测方法

说明书

本申请公开了一种反应动力学定量探测仪及转动马达ATP合酶活性检测方法，该检测方法包括：(1)将带电池的转动马达、磷酸根和荧光素/荧光素酶混合后分成两等份；(2)分别加入测试样品池和对照样品池；(3)在对照样品池中注入缓冲液，在测试样品池中注入不同浓度的ADP，测试样品池中发生酶促反应产生荧光；(4)开启探测仪，检测测试样品池中的产物ATP与荧光素/荧光素酶反应产生的荧光，检测对照样品池中的荧光强度；(5)针对不同标准浓度的ATP，测得对应的F_ATP，进而生成校准曲线；(6)制作米氏曲线；(7)根据米氏公式：拟合所得的Vmax即是衡量F_oF₁‑ATPase活性的参数；(8)判断F_oF₁‑ATPase活性。本发明能够方便快捷的检测ATP合酶活性。

技术领域

本申请涉及一种检测方法，具体涉及反应动力学定量探测仪及转动马达ATP合酶活性检测方法。

背景技术

三磷酸腺苷ATP合成酶是嵌膜复合蛋白，广泛存在于细菌、线粒体和叶绿体中。位于分泌泡上的合酶也称V-ATPases，而古细菌中的合酶又称A-ATPases。ATP合酶在结构上可被分拆成嵌膜的Fo和亲水的F₁两个转动马达。三对αβ亚基环成F₁“定子”，γ则是其结构上非轴对称的“转子”(偏心轴)；膜内的a蛋白和质子通道C_n则分别是Fo的“定子”和“转子”。两个马达的“定子”和“转子”分别通过δb₂蛋白组合和ε亚基连接成一体，耦合成一个可逆马达FoF₁-ATP合酶。

现有技术中还没有一种能够方便快捷的检测ATP合酶活性的方法。

发明内容

鉴于现实需要，期望提供一种能够方便快捷的ATP合酶活性的检测方法。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

本发明实施例提供一种反应动力学定量探测仪，包括：

测试转盘，所述测试转盘上设有测试样品池和对照样品池，所述测试转盘通过转轴连接电机，所述电机能够带动所述测试转盘转动和定位；

控制器，通过导线连接电机，用于控制电机的转轴转动和定位；

光电倍增管，通过导线连接所述控制器，用于采集测试样品池或对照样品池中的样品自发光的化学荧光，将所述化学荧光转换成电信号并发送给所述控制器的数据处理系统，所述控制器的数据处理系统根据接收的电信号分析测试样品或对照样品的检测浓度。

所述电机还连接有码盘和码盘计数器，用于测试样品池或对照样品池的定位，所述码盘计数器通过导线连接所述控制器。

所述测试样品池和对照样品池对称设置在所述测试转盘的中心轴线的两侧，所述测试样品池和对照样品池位于所述测试转盘的同一条轴线上。

本发明实施例还提供一种反应动力学定量探测仪，包括：

测试转盘，所述测试转盘上设有测试样品池和对照样品池，所述测试转盘通过转轴连接电机，所述电机能够带动所述测试转盘转动和定位；

控制器，通过导线连接电机，用于控制电机的转轴转动和定位；

光电倍增管，通过导线连接所述控制器，用于采集测试样品池或对照样品池中的样品自发光的化学荧光，将所述化学荧光转换成电信号并发送给所述控制器的数据处理系统，所述控制器的数据处理系统根据接收的电信号分析测试样品或对照样品的检测浓度。

所述电机还连接有码盘和码盘计数器，用于测试样品池或对照样品池的定位，所述码盘计数器通过导线连接所述控制器。