[发明专利]利用RPA技术检测寨卡病毒的方法及其专用成套试剂

权利要求书

1.检测寨卡病毒的成套试剂，由引物对X和探针X组成；

所述引物对X由引物F和引物R组成；所述引物对X的靶序列含有特异DNA片段；所述特异DNA片段为如下y1)或y2)：

y1)序列表中序列1所示的单链DNA分子；

y2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；

所述探针X为46-52个核苷酸组成的单链DNA分子，从5’至3’依次包括DNA片段甲、外切酶exo的切断位点和DNA片段乙；

所述DNA片段甲为30-35个核苷酸组成的单链DNA分子，与所述特异DNA片段上的区段甲部分相同；

所述DNA片段乙与所述特异DNA片段上的区段乙部分相同；

所述区段甲和所述区段乙在所述特异DNA片段上无重叠。

2.如权利要求1所述的成套试剂，其特征在于：所述外切酶exo的切断位点为四氢呋喃。

3.如权利要求1或2所述成套试剂，其特征在于：

所述引物F为如下a1)或a2)：

a1)序列表中序列3所示的单链DNA分子；

a2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的单链DNA分子；

所述引物R为如下b1)或b2)：

b1)序列表中序列2所示的单链DNA分子；

b2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的单链DNA分子；

所述DNA片段甲为如下c1)或c2)：

c1)序列4所示的单链DNA分子；

c2)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的单链DNA分子；

所述DNA片段乙为如下d1)或d2)：

d1)序列5所示的单链DNA分子；

d2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的单链DNA分子。

4.如权利要求1至3任一所述成套试剂，其特征在于：所述DNA片段甲的末端具有荧光标记；所述DNA片段乙的一个末端具有荧光淬灭基团，另一个末端具有封闭基团。

5.权利要求1至4任一所述成套试剂中的所述引物对X。

6.权利要求1至4任一所述成套试剂或权利要求5所述引物对X的应用，为如下d1)或d2)或d3)或d4)：

d1)制备用于检测或辅助检测寨卡病毒的试剂盒；

d2)检测或辅助检测待测样品中是否含有或疑似含有寨卡病毒；

d3)制备用于鉴定或辅助鉴定寨卡病毒的试剂盒；

d4)鉴定或辅助鉴定待测病毒是否为候选的寨卡病毒。

7.含有权利要求1至4任一所述成套试剂或权利要求5所述引物对X的试剂盒。

8.权利要求7所述试剂盒的应用，为如下d2)或d4)：

d2)检测或辅助检测待测样品中是否含有或疑似含有寨卡病毒；

d4)鉴定或辅助鉴定待测病毒是否为候选的寨卡病毒。